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        转化材料的制备

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        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        一、单链载体 DNA 的制备

        1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。

        2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml 和 10 个 1 ml 的等份,储存于 -20℃。

        3. 在使用前,将 1 ml 的载体 DNA 煮沸 10 分钟,并于冰水浴中迅速冷却。

        二、醋酸锂的制备

        1. 在 90 ml 双蒸水中溶解 10.2 g LiAc。

        2. 调节终体积到 100 ml,过滤除菌。

        三、PEG 的制备

        1. 将 50 g 分子量为 3350 的 PEG 放入 150 ml 的玻璃烧杯中,加入 35 ml 双蒸去离子水。

        2. 用磁力搅拌器搅拌至溶解,大约需要 30 分钟。

        3. 将液体转移到 100 ml 的量筒中。

        4. 用少量双蒸水洗一下烧杯并加到盛 PEG 的量筒中,使体积恰恰达到 100 ml,通过颠倒充分混匀。

        5. 用 0.45 μm 的滤膜过滤除菌,储存于带密封盖的瓶子中。

        来源:丁香实验

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