• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        细胞RNA含量样品的制备及分析

        相关实验:细胞 RNA 含量样品的制备及分析

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        一、试剂配制

        1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100 ml,稀释为 0.01% 的浓度。

        2. 1.0 mol/L pH 4.7 醋酸缓冲液的配制:冰醋酸 11.55 ml 加蒸馏水至 1000 ml;无水醋酸钠 16.4 g 加蒸馏水至 1000 ml;分别取上述两种液体 255 ml 和 245 mI,再加入 200 ml 蒸馏水即成。

        3. 配制 pH 7.2 的磷酸缓冲液。

        4. DNA 酶消化液的制备:DNA 酶 0.05 mg/ml,0.25 mol/L 枸橼酸,2.5 mol/L TrisHCl,调 pH 为 6.0。

        二、染色程序

        1. 制备单细胞悬液,浓度为 1x106/ml。

        2. 加入 DNA 酶液 0.5 ml,37℃,消化 20 min,弃去 DNA 酶。

        3. 加入 0.01% 的 PY 工作液 1.0 ml,室温下染色 30 min,离心沉淀(800 r/min 离心 5 min)。

        4. 去染色液,以 PBS 液洗 3 次,再加入 1.0 ml PBS,上机检测。


        来源:丁香实验

        ad image
        ad image

        相关问答

        为什么rna酶活性稳定,很难被破坏,煮沸,高压灭菌都不能破坏它?

        3 回答 5565 围观
        2022-05-27

        我是用trizol提rna的,刚开始自己上手,加了氯仿静置后离心,结果清液在下层,这是怎么回事。

        2 回答 3586 围观
        2023-05-07

        Trizol提取RNA,加氯仿离心后没有分三层,为什么啊?

        3 回答 3429 围观
        2022-10-13

        RNA的提取时260\230

        4 回答 2954 围观
        2022-06-20

        提取细胞RNA时,不小心将trizol试剂打翻洒在了超净工作台上,该如何处理呢

        5 回答 2740 围观
        2022-05-21

        细胞样品抽提RNA的数量问题

        3 回答 2086 围观
        2022-05-09

        细胞提取rna跑胶条带太暗,还有弥散条带怎么办

        5 回答 2037 围观
        2022-05-13

        提取细胞rna浓度260/280过低,但是跑胶胶带又正常,还能使用吗

        6 回答 1439 围观
        2023-02-25

        RNA抽提方法的比较

        4 回答 1350 围观
        2022-06-12

        请问为什么提取RNA的时候最后没有看到羽毛状沉淀呢?

        6 回答 1306 围观
        2022-06-06

        提牡蛎血细胞RNA,总是看不到28s条带,18s条带很亮,5s很淡,是什么原因呢

        2 回答 1221 围观
        2022-12-18

        Trizol法提取rna当细胞较少时也是用1ml吗,如果减少用量的话,氯仿、异丙醇也要按比例减少?

        5 回答 1214 围观
        2022-09-28

        骨髓细胞提取的rna量太少,无法进行实验,有什么办法可以提取多一点?

        5 回答 1041 围观
        2023-02-26

        提RNA后测浓度,260/280在 2.16,260/230在1.47这个RNA还能用不,用于逆转录

        3 回答 939 围观
        2022-07-01

        大家铁死亡抑制剂用多大的量呢?

        4 回答 804 围观
        2022-06-14
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序