种子生活力的快速鉴定实验

凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用，吸收空气中的O2，同时放出CO2，CO2溶于水生成H2CO3，H2CO3不稳定解离成H+和HCO3－。由于H2CO3不断解离，就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图：

 

它的变色范围为pH6.0－7.6之间，它在酸性介质中呈黄色，在碱性介质中呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。

一、材料和设备

玉米或小麦种子

恒温箱、培养皿、镊子、滤纸、药物天平、烧杯、漏斗、琼脂、BTB、电炉、50  ml 量筒

0.1%BTB溶液：称取BTB 0.1克，溶解于煮沸过的自来水中，然后用滤纸滤去残渣。滤液若呈黄色，可加数滴稀氨水，使之变为蓝色或蓝绿色，此液长期贮存于棕色瓶中。

1.5%BTB琼脂凝胶：取0.1%BTB溶液40 ml 置于烧杯中，另称取0.5克琼脂，将其剪碎后加入杯中，用小火（电炉）加热并不断搅拌。待琼脂完全溶解，稍稍冷却即可趁热倒入9cm 培养皿中，使之成一均匀的薄层，完全冷却后备用。

二、实验步骤

1．浸种：将待测种子在30℃－35℃温水中浸种5小时左右，以增强种胚的呼吸强度。

2．显色：取吸胀种子10粒，整齐地埋于备好的琼脂凝胶中，注意要将胚埋入凝胶中。将培养皿置于35℃温箱中一小时可见结果，两小时以上结果更为明显。观察种胚周围出现黄色晕圈的是活种子，否则是死种子。

3．计算：逐一数出种胚周围出现黄色晕圈的种子数，并计算出有生活力种子的百分率