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        加支持物培养法

        相关实验:特殊细胞培养实验

        最新修订时间:

        原理

        加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的方法。

        待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从
        瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。

        各种对细胞无毒性的如
        玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物用。

        材料与仪器

        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  支持物制备

        (1)特制有机玻璃、特氟隆薄膜、玻璃等

        其中以玻璃片和特氟隆薄膜最为多用。前者
        便于做各种固定、染色处理和观察;后者最适做电镜技术,允许做包埋和切片。

        (2)加支持
        物培养法程序与一般培养法相同,只是在培养前需在培养瓶中加入已经消毒的支持物。特氟隆薄膜为定型菌包装产品,用时无菌条件下启封,用剪刀按需要剪成各种不同大小的块,于培养接种细胞前,先置入培养容器中即可。

        (3)通常多用盖玻片做支持物,用
        前先要把盖片用玻璃刀切成一定形态,以便装入培养瓶中,然后按如下顺序处理

        自来
        水浸泡24 小时→96 %酒精30~60 分钟→蒸馏水浸泡30~60 分钟→用干净软布擦拭干净(擦时应戴白手套工作)→装入培养器皿中→高压或干热灭菌备用。

        2.  培养法
         
        初代消化培养、初代组织块培养、传代培养等皆可应用加支持物培养法。接种细胞后,可在任何进间取出支持物,做各种观察或实验。支持物培养法中最重要的是支持物一定要处理干净,不残留任何对细胞有害成分,以免不利细胞贴附和生长增殖。

        来源:丁香实验

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