原理
由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同，在pH值不同的溶液中，蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下，整个蛋白质所带负电荷多，则为酸性蛋白质；带正电荷多，则为碱性蛋白质。据此，可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后，用不同pH值的固绿染液分别染色，细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。
材料与仪器
步骤
一、方法
1. 以破坏脊髓法处死蟾蜍，将其腹面向上放人蜡盘中，剪开胸腔，打开心包。小心将心脏剪一小口，取心脏血一滴滴在干净载玻片一端，推片，按此法制备二张血涂片，室温晾干。
2. 将涂片作好标记放在70%乙醇中固定5分钟，室温晾干。
3. 放入5%三氯醋酸中60℃30分钟，抽提出核酸。
4. 清水冲洗多次（3分钟以上），以冲去痕迹的三氯醋酸。
5. 滤纸吸干玻片上水分。
6. 一张片放入0.1%碱性固绿（pH8.0~8.5）中染色10~15分钟，另一张片放入0.1%酸性固绿（pH2.0~2.5）染色5~10分钟。
7. 清水冲洗，盖上盖片镜检。
二、结果
经碱性固绿染色片中，胞质、核仁不着色，细胞核大部分被染成绿色，是为碱性蛋白质存在处。经酸性固绿染色片中，因胞质和核仁中有酸性蛋白，被染成绿色。
来源：丁香实验
