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        细胞组分的化学反应实验

        实验分类:

        细胞实验

        最新修订时间:

        简介

        了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理,掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。

        来源:丁香实验

        操作方法

        Brachet反应

        一、方法 1. 接种Hela细胞于盖片上并培养24~48小时,使长成单层。 2. 取出盖片,用PBS(pH7.2)轻轻冲洗盖片表面去除残渣。 3. 放入Carnoy固定液中固定l小时。 4. 浸入甲基绿-呱咯宁醋酸缓冲液中30分钟染色。 5. 取出盖片放入蒸馏水中轻轻漂洗2~3次(2~3秒钟左右),吸去水分。放入纯丙酮中分色2~3秒钟。 6. 放

        细胞内碱性蛋白和酸性蛋白的显示

        一、方法 1. 以破坏脊髓法处死蟾蜍,将其腹面向上放人蜡盘中,剪开胸腔,打开心包。小心将心脏剪一小口,取心脏血一滴滴在干净载玻片一端,推片,按此法制备二张血涂片,室温晾干。 2. 将涂片作好标记放在70%乙醇中固定5分钟,室温晾干。 3. 放入5%三氯醋酸中60℃30分钟,抽提出核酸。 4. 清水冲洗多次(3分钟以上),以冲去痕迹的三氯醋酸。 5. 滤纸

        细胞内过氧化物酶的显示

        一、方法 1. 取小鼠一只,以颈椎脱位法将其处死,迅速剖开其后肢暴露出股骨,将股骨一端斜向剪断,用PBS缓冲液湿润过的注射器针头吸出骨髓一滴滴到载玻片上。 2. 推片,室温晾干。 3. 将涂片放入0.5%硫酸铜中浸30秒~1分钟。 4. 取出涂片直接放入联苯胺混合液中反应6分钟。 5. 清水冲洗,放入1%番红溶液中复染2分钟。 6. 清水冲洗,室

        过碘酸雪夫反应(PAS)

        一、方法 1. 取1~2 mm 厚的肝组织块,用Carnoy氏液4℃固定4~6小时。 2. 乙醇脱水、二甲苯透明。石蜡包埋,切片。 3. 用70%乙醇展片。 4. 脱蜡:二甲苯(1)5分钟→二甲苯(2)5分钟→100%乙醇5分钟→含1%火棉胶的乙醇液1分钟→70%乙醇1分钟。 5. 直接浸入过碘酸酒精液反应5~15分钟,经70%乙醇洗片刻。 6.

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