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        微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交(CGH)实验

        实验分类:

        遗传学实验

        最新修订时间:

        简介

        染色体 CGH 的独特优点在于它的全基因筛查功能,与检测单一靶 DNA 剂量改变的低通量方法,如 Southern 分析、PCR 和荧光原位杂交(FISH) 相比,速度显著提高且省力。目前染色体 CGH 是一种比较完善的分子细胞遗传学方法,但是它的两个缺陷限制其作为一种综合性筛查工具的应用。

        来源:《分子细胞遗传学技术与应用》

        操作方法

        微阵列 CGH 实验

        一、cDNA阵列CGH(1)阵列制备与变性探针杂交前,先用封闭液(盖上盖片)在37℃封闭cDNA阵列1h(2)随机引物标记基因组DNA1.肿瘤和正常组织基因组DNA各2μg分别用Dnp II消化1〜1.5h。将消化产物进行纯化(QiaquickPCR试剂盒)、真空干燥,用25μL水重悬。2.使用Bioprime标记试剂盒基本按说明书进行随机引物标记,稍作改动。100℃变性DNA和20斗随机引物(试

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