用 cDNA 芯片分析人类基因表达实验

实验分类：

遗传学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

描述了 cDNA 芯片在人类基因表达分析中的用途。制备 cDNA 芯片的方法之一是用一个特制的打印机将扩增的 cDNA 转移至显微镜载（玻）片上。标记 cDNA 探针的制备以及与芯片的杂交也有所描述。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案1 cDNA 合成与印迹

1.密封的低密度标准培养基中 37°C 培养过夜（大部分卖方提供低密度培养基）。如果已经高密度培养过可以省去这个步骤，否则会降低活性。 2.准备重复的 96 孔板分别标记，每孔中加入 100ul 的含 100 ul/ml 氨苄的培养基。（通过氨苄抗性检查 EST 克隆）标记孔板以方便辨认。为保存孔板，一种工作孔板被用做培养基来源（第 2~5 步）。

基本方案2 RNA 抽提和标记

基本方案3 杂交和数据提取