新鲜实体组织样本的制备（机械法）

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」王书奎、周振英主编。

来源：丁香实验

操作方法

剪碎法

1. 将组织块放入平皿中，加入少量生理盐水。 2. 用剪刀将组织剪至匀浆状。 3. 加入 10 ml 生理盐水。 4. 用吸管吸取组织匀浆，先以 100 目尼龙网过滤到试管中。 5. 离心沉淀 1000 r/min，4~5 min，再用生理盐水洗 3 遍，每次以低速（500~800 min）短时离心沉淀去除细胞碎片。 6. 以 300 目尼龙网滤去细胞团块。 7. 细胞用固定液固定或低

网搓法

1. 将 100 目、300 目尼龙网扎在小烧杯上。 2. 把剪碎的的组织放在网上，以眼科镊子轻轻搓组织块，边搓边加生理盐水冲洗，直到将组织搓完。 3. 收集细胞悬液，500~800 r/min 离心沉淀 2 min。 4. 固定细胞或低温保存备用。

研磨法

1. 先将组织剪成 1~2 mm3 大小组织块。 2. 放入组织研磨器中加入 1~2 ml 生理盐水。 3. 转动研棒，研至匀浆。 4. 加入 10 ml 生理盐水，冲洗研磨器。 5. 收集细胞悬液，并经 300 目尼龙网过滤，离心沉淀 500~800 r/min，1~2 min，再以生理盐水洗 3 遍，离心沉淀。 6. 固定或低温保存细胞悬液，备用。