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条实验概况及操作方法
神经聚集物
从妊娠 17 d 或 18 d 的胎鼠取出脑(与地方动物伦理委员会联系),将脑制成单细胞悬液。通过在用琼脂预涂的多孔培养板中培养,使脑细胞形成聚集物。在 20 d 的培养过程中,聚集物中的细胞形成成熟的器官样脑结构。
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滤膜培养皿
将细胞接种入滤膜培养皿内,在多孔培养板中以过量的培养液进行培养。
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藻酸盐包被
用胰蛋白酶消化 75 cm2 培养瓶中的细胞,计数后与藻酸盐溶液混合。用注射器将藻酸盐细胞悬液滴加入氯化钙溶液,制成微珠,然后悬浮培养。
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球体培养
用胰蛋白酶消化单层细胞或分散原有组织,将细胞接种到涂布琼脂的底物上。将聚集物转移到 24 孔培养板,进行分析。
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结肠直肠肿瘤细胞的培养
通常用酶消化腺瘤,用手术刀片将癌组织切碎。如果分化良好的结肠直肠癌标本切开后仍不易分离细胞,可用酶消化方法分离。
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造血细胞集落形成实验
用琼脂或甲基纤维素混悬骨髓细胞,然后将细胞接种于培养皿,加入合适的生长因子。
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骨髓造血细胞的长期培养
将骨髓吸入培养液。作为附着的多层细胞,骨髓至少维持 12 周,可达 30 周。干细胞、趋向成熟的骨髓细胞和成熟骨髓细胞从附着的细胞层释放入培养液。粒细胞或巨噬细胞的祖细胞可用软凝胶培养检测。
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成骨细胞原代培养实验
本实验用于成骨细胞的原代培养。
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脂肪细胞的原代培养
本实验主要用于脂肪细胞的原代培养。
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细胞系的 DNA STR 谱
细胞系的DNA STA谱分析可以用于:通过与基础图谱进行比对,即可对每一批新细胞系的种类进行确认。
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密度梯度细胞分离法
本实验主要用于分离细胞。
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分离小鼠胚胎实验
分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。
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过滤装置的灭菌
本实验来源于:动物细胞培养——基本技术指南(第五版)
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报告基因:β-半乳糖苷酶的原位染色实验
β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于:(1)确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞;(2)来示踪细胞与细胞相互作用。
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原代肾上皮细胞培养实验
肾上皮细胞培养可应用于:(1)研究如受甲状旁腺激素 抑制的Na+依赖性无机磷转运系统;(2)研究磷酰基甲酸的特异性和Na+和 P 同向转运的抑制剂。(3)作为肾小管氧化剂损伤的模型。
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氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验
通过测定转染细胞的报告基因表达,如β-gal或CAT,可以确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞主要用于(1)测定基因表达(2)基因整合评价(3)细胞的调控。来源于《动物细胞培养:基础技术指南(第五版)》
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表皮角质形成细胞模型构建实验
培养的表皮角质形成细胞可用作:(1)分化模型、器官型培养的理想组织构建物和细胞间相互作用的研究;(2)烧伤或外伤修复的移植物。
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复苏冻存细胞实验
快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种 来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版
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基于 MTT 的细胞毒性实验
主要用于检测效应细胞对靶细胞的杀伤活性。
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鸡胚分离实验
动物细胞培养:基础实验指南 由于鸡胚比同期的小鼠胚胎大,故较易分离。与小鼠胚胎一样,鸡胚可提供间充质细胞原代培养,用于细胞增殖分析,用作饲养层细胞,并可作为病毒繁殖的基质。由于鸡胚体积较大,故也较易分离出单一器官以产生特殊类型的细胞,如肝细胞、心肌和肺上皮细胞。应用鸡胚也要符合动物法规( 例如在英国),使用超过孕期一半的胚胎要有许可证
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