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        抗肽的抗血清制备以及从多肽库中筛选 B、T细胞抗原表位

        实验分类:

        免疫学实验

        最新修订时间:

        简介

        介绍了如何选择一条合成肽用以制备识别完整蛋白的抗血清:包括如何选 择 合 适 的 多 肽 用 来 免 疫 ,如 何 将 多 肽 结 合 至 载 体 蛋 白 及 设 计 合 成 多 价 抗 原 肽 阐述了针对抗原肽的抗血清的制备方法,同 时 介 绍 了 免 疫 接 种 流 程 、E L I S A 法测定抗体滴度及亲和层析法纯化能够与抗体特异结合的多肽的方法。
        作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」

        来源:丁香实验

        操作方法

        使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白

        基 本 方 案 使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白 材 料 家兔 肽-载体的连接体(单 元 13. 1) P B S , p H 7. 5 弗 氏 完 全 佐 剂(F C A ; Pierce Biotechnology) 弗氏不完全佐剂 1 . 收 集 血 样(如从耳动脉或耳静脉),每只家兔准备 2〜5m l 免 疫 前 的 血 清(单 元 1.2)。至少准备

        采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位

        基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂 材 料 肽或蛋白质抗原 目的抗原的单克隆抗体(M A b ) 1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS) 六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m g / m l 的 1 2 0 肽 混 合 物(若 需 详 细 资 料 ,联系C. Pin

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