免疫学实验

双重标记是利用免疫学和细胞化学原理，在同一张切片上同时采用或先后采用不同颜色的荧光色素或酶促产物，或采用不同直径大小颗粒胶体金来原位标记两种或两种以上抗原-抗体复合物，达到在同一细胞或亚细胞水平显示不同抗原成分（定性、定位、定撤），分析不同抗原成分相互间功能的增消关系，操作遵循的原则与要求同单标免疫组化方法。其组合方法多种多样，可根据各实验室现有试剂进行组合，也可购置较为成熟的商品化试剂盒。另外，

介绍了一种制备可溶性M H C -I g 二聚体的方法，介绍了一种制备多聚体M H C -I/肽复合物的方法。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

介绍了一种受磷酸耗调节的能有效介导反转录载体质粒D N A 进入细胞的反转录病毒包装系统的转染方法。介绍了基于P C R 技术检测 B 细胞发育过程中的同型转换。用P C R 检测稀有 m R N A ，分别为 P C R 对 人 或 小 鼠 的 T C R 可变区基因进行定性和定量，通 过 P C R 产物克隆和测序来研究表达基因的连接多样性。提供了 R N A 酶保护实验方案， R N A 酶

详细阐述利用亲和层析分离蛋白质的过程，进行蛋白质分析时，需将此规模缩小至微量离心管中进行免疫沉淀过程，对于单一的蛋白质或由相同亚基组成的蛋白质，经单向凝胶电泳后检测到单一的 蛋 白 质 条 带对荧光染色法进行了阐述，它主要用于磷蛋白和糖蛋白的检测。为了确定蛋白质是否是特异性抗原，可采用相对应的抗体进行免疫印迹分析 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

分 离 人 肠 黏 膜 单 个 核 细 胞 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

抗原特异性T 细胞的诱导 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

T细胞杀伤功能的检测可以应用于（1）免疫细胞功能测定（2）临床免疫诊断。

分离出来的T 细胞用抗CD8 抗体可分为CD4 + 和 CD8+ T 细胞。由于两种细胞都可 回收，此法优于抗体和补体溶解法 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

外周血单个核细胞可应用于： （1）免疫学（包括自身免疫性疾病），传染病，血液系统恶性肿瘤，疫苗开发，移植免疫学研究； （2）预测药物和异生素免疫抑制作用； （3）高通量筛选本实验来自「精编免疫学实验指南」作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

巨噬细胞的活化经历两个阶段：致敏阶段和激活阶段。活化巨噬细胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案则明确区分巨噬细胞活化的这两个阶段。经过一段时间 诱 导 后 （48〜72h) ，可 检 测 巨 噬 细 胞 对 病 原 体 （如寄生虫或细菌；单 元 6. 5 和 6. 6)的杀伤作用或所合成的活性氮介质（reactive nitrogen intermediates， R N I ; 单

提供一种人单核/ 巨噬细胞的表型检测方法。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本单元介绍用4 色 荧 光 分 析 CD4+ T 细 胞 内 表 达 IFN-7、 IL-4、 IL- 2 水平的方法 (可用于计算T h l 和 T h 2 细胞比例）。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

流式细胞仪用于分析细胞表达的膜表面抗原和胞内抗原，能够特异性地区分异质性群体中的不同细胞类型、评价分离细胞亚群的纯度、分析细胞大小和体积。该技术主要检测结合了某种细胞抗原分子的荧光偶联抗体或配体的荧光强度。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

在免疫学中脂筏是很重要的，因 为 T 细胞受体和几个其他重要的T 细胞信号转导蛋白均存在于脂筏中，或者在转导信号时被募集到脂筏中。与此相似，嗜碱粒细胞上高亲 和 力 IgE受体在转导信号时也被募集到脂筏中。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

抗磷酸肽的抗体可以识别仅处于磷酸化状态的蛋白质。该抗体不与同种的未磷酸化蛋白质或其他磷酸蛋白质发生交叉反应。由于蛋白质的磷酸化状态通常反映一种蛋白质的功能状态或活性，因此利用此种抗体是检测蛋白质功能状态的便捷手段。 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

本单元主要介绍小鼠T 淋巴细胞增殖实验 作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」

作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」