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        脂质体转染

        最新修订时间:

        简介

        细胞转染方法之一

        原理

        脂质体((Iiposome)作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛,用合成的阳离子脂类包裹DNA,同样可以通过融合而进人细胞。使用脂质体将DNA带人不同类型的真核细胞,与其它方法相比,有较高的效率和较好的重复性。 中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电 的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。

        应用

        细胞转染

        来源:丁香实验

        操作方法

        🔥 脂质体转染

        (1)细胞培养:取 6 孔培养板(或用 35 mm 培养皿),向每孔中加入 2 mL 含 1~2×105 个细胞培养液,37 ℃ CO2 培养至 40%~60% 汇合时(汇合过度,转染后不利筛选细胞)。(2)转染液制备:在 EP 管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)。A 液:用不含血清培养基稀释 1~10 μg DNA,总量 100 μL;B 液:用不含血清培养基稀释 3 倍体积的转染试

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