破骨细胞的分离培养
蛋白质实验
最新修订时间：
合作专家 | 孙汉寅硕士
生物与医药学 中国科学院大学
审核专家 | 聂壹峰博士
纳米生物医学 中国科学院大学
简介
作为高度分化的多核巨细胞，破骨细胞主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能的细胞，目前研究破骨细胞分化的经典细胞系包括小鼠 RAW264.7 单核巨噬细胞系与小鼠原代 BMMs 细胞系。
其中 RAW264.7 细胞是 Abelson 鼠白血病病毒诱导 BALB/c 小鼠肿瘤生成后，收集小鼠腹水中单核样巨噬细胞得到的细胞株，被广泛应用于细胞生物学和免疫学研究中。RAW264.7 细胞突破了原代单核巨噬细胞不能增殖传代的限制，并且通过 RANKL 诱导获得的 RAW-OCs 骨吸收能力与 RANKL 诱导 BMMs 分化形成的破骨细胞相似。
BMMs 属于原代细胞，在体外培养过程需要额外添加 M-CSF 维持其存活，并且BMMs 不能传代，但 BMMs 能够更好的模拟人体内破骨细胞的分化及骨分解功能。
原理
破骨细胞是分化后的终末细胞，没有增殖分裂的能力，在体内是单核巨噬细胞 BMMs 分化而来的。BMMs 细胞表面表达 c-fms 和 RANK 受体，在细胞因子 M-CSF 和 RANKL 的作用下，单核巨噬细胞能够增殖并启动分化。因此在体外培养破骨细胞 RANKL 和 M-CSF 两种细胞因子缺一不可，应先提取 BMMs 并在培养基里添加 M-CSF 和 RANKL 从而启动细胞分化，获得破骨细胞。
应用
用以模拟体内破骨细胞分化过程，获得破骨细胞后对药物进行筛选，探索分化前后细胞通路、基因水平、蛋白水平的变化情况。
图源自：S. L. Teitelbaum, Science 2000, 289, 1504~1508.
来源：
操作方法
作为高度分化的多核巨细胞，破骨细胞主要来源于单核/巨噬细胞造血干细胞系，是一种具有骨吸收功能的细胞，目前研究破骨细胞分化的经典细胞系包括小鼠 RAW264.7 单核巨噬细胞系与小鼠原代 BMMs 细胞系。其中 RAW264.7 细胞是 Abelson 鼠白血病病毒诱导 BALB/c 小鼠肿瘤生成后，收集小鼠腹水中单核样巨噬细胞得到的细胞株，被广泛应用于细胞生物学和免疫学研究中。RAW264.7 细
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