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从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
最新修订时间：
简介
来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》
来源：丁香实验
操作方法
①如实验方案6所述裂解细胞。②4℃条件下23000g离心细胞裂解液30min。③倒出上清，测定沉淀的湿重。④用约10倍体积的洗涤缓冲液重悬沉淀，室温搅动悬浮液1h。⑤4℃条件下23000g离心混合物30min。⑥除去上清，并重悬沉淀。⑦重复④〜⑥步骤3次以上（直到重组蛋白的纯度>80%）。⑧溶解步骤⑦的沉淀物，每克湿重沉淀（由步骤③决定）加入约8ml的溶解缓冲液，在4℃条件下温和搅动混合物1
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