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        定量 SDS 凝胶染色与扫描

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        大多数蛋白质虽然每毫克能结合大致相同量的染料,但不同蛋白质之间结合染料的能力仍有 10% 或更大的差异。因此,本法所得的数值不是非常准确的,除非你能用相同的蛋白质作标准来测定蛋白浓度。不过,一般说来,CBB 染色要比银染准确得多。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

        来源:丁香实验

        操作方法

        定量SDS凝胶染色与扫描

        设备 SDS-PAGE 电泳装置 凝胶扫描装置 试剂 考马斯亮蓝(CBB) 染色液 脱色液 (配方,见“试剂的配制”,PP.184~189) 操作程序 1) 小心地在 SDS 凝胶泳道上加一组按量递增为序的蛋白质样品,再按同样顺序加一组纯蛋白质样品作为定量的标准。按常规进行电泳(见附录 5)。 2) 从电泳装置取下凝胶,置于脱色液中漂洗 1 min 以脱去部分 SDS,再将它浸泡

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