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        核酸的定量测定实验

        实验分类:

        蛋白质实验

        最新修订时间:

        简介

        本实验旨在了解和掌握紫外分光光度法、定磷法、定糖法测定核酸的基本原理和操作方法。共描述了3种方法。

        来源:丁香实验

        操作方法

        紫外分光光度法

        1. 用分析天平准确称取待测的核酸样品500 mg , 加入少量蒸馏水调成糊状, 再加入少量的水稀释。然后用5% ~6% 氨水调至pH7 , 定容到50 ml 。 2. 取两支离心管, 向第一只管内加入2 ml 样品液和2 ml 蒸馏水, 向第二只管内加入2 ml 样品液和2 ml 沉淀剂( 以除去大分子核酸) 作为对照。混匀, 在冰浴中放置30 min 后离心( 3000r/ min

        地衣酚显色法

        1. RNA 标准曲线的制作: 取试管6 支, 按下表所示添加试剂。 加毕混匀, 于沸水浴中加热20 min , 取出置自来水中冷却,以零号管为对照, 于670 nm 处测光密度值。以光密度为纵坐标,RNA 浓度为横坐标作图, 绘制标准曲线。 2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为空白管,在样品管中加入1 . 0 ml 样品液, 空白管操作与

        二苯胺法

        1. 标准曲线的绘制: 取干燥试管6 支, 编号, 按下表加入试剂。 加完后混匀, 于60 ℃恒温水浴中保温1 h , 冷却后于595 nm处比色测定, 以零号管调零点。以DNA 浓度为横坐标, 光密度为纵坐标, 绘制标准曲线。 2. 样品测定: 取试管3 支, 两支为样品管, 一支为对照管。对照管操作与标准曲线零号管相同。向每支样品管加2.0 ml 样品液及

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