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多肽的固相合成、切割及纯化
固相肽合成技术是现代蛋白质化学的一项关键技术,也是对现代分子生物学和基因工程研究具有重大影响和重要意义的技术。它的基本过程为:1、偶联保护氨基,即将第一个保护氨基以共价键偶联外固相载体上(在合成过程中始终不能脱落)。2、脱保护,在侧键基团保持稳定条件下脱去氨基上的保护,暴露出自由氨基,例如脱去Fmoc。3、偶联,将下一个已活化的氨基酸与结合于固相的前一个氨基酸缩合形成肽键。4、肽键延长,反复进行脱
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核酸酶保护实验
核糖核酸酶保护实验(Ribonuclease protection assay,RPA)是近十年发展起来的一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合,形成双链RNA;未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸,而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链
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膜钳片
运用膜片钳 进行膜离子通道特性的研究,是一项艰辛、细致、繁杂的工作,要求较高的技术水平和实验条件作保证,现在大致介绍一下膜片钳 实验的过程。
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慢病毒包装实验
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:(1)感染原代培养细胞;(2)制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;(3)in vivo的基因操作、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。
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血清制备实验
抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清,一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。
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血清蛋白琼脂糖凝胶电泳
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳可应用于:(1)测定血清中蛋白质含量;(2)诊断疾病。
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血浆游离血红蛋白测定
血浆游离血红蛋白的测定可以用于:(1)与红细胞的使用价值近似。(2)血红蛋白的升高和降低可参考红细胞升高与降低的临床意义。
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血红蛋白电泳
血红蛋白电泳可以用于:检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。
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蛋白质测序
蛋白质测序可用于: (1)鉴定蛋白质; (2)表征蛋白质翻译后修饰。 (3)分析蛋白质一级结构与功能的关系。
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免疫球蛋白提取技术
免疫球蛋白提取技术可应用于:(1)推知机体的体液免疫功能;(2)诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。
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双向电泳操作步骤
双向电泳可应用于蛋白质组学研究。
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蛋白质凝胶电泳凝胶的制备
蛋白质凝胶电泳通常用于(1)分析分子生物学、遗传学和生物化学(2)制备技术(3)采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。
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蛋白质的抽提实验
蛋白质的抽提实验是进行蛋白质实验分析的基本操作,可用于(1)蛋白质的分离(2)蛋白质功能结构检测(3)蛋白质表达前的基本操作。
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蛋白质的纯化实验
不同大小的蛋白质分子进入胶体过滤管柱,可依其分子量差异分离;是一种广泛应用的蛋白质partition色析法 。
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蛋白质含量测定实验
蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。
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蛋白质的表达、分离、纯化实验
蛋白质表达、分离、纯化可以:(1)探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理;(2)供作结构与功能的研究;(3)作为催化剂、营养剂等。
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