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        通用 PCR

        实验分类:

        PCR 技术

        别名:

        universal PCR

        最新修订时间:

        简介

        通用 PCR,英文名是 universal PCR,通用 PCR 作为一种基本的分子生物学技术,通过与其它新兴的基因分析技术结合。与经典 PCR 相比,通用 PCR 的应用把系统发育的序列比较分析范围扩展到了纲或门的分类水平上。而且此法对鉴定标本和划分生物类型在种群中的位置起重要作用。面对生物种类繁多、核酸序列千差万别,通用 PCR 技术的应用,不但最大限度地减轻了使用者不必要的工作量,也减少了出现操作误差和交叉污染的机会,而且加快了检验速度。与此同时,也使检测成本大幅度降低。

        目前,用于通用 PCR 的方法主要有 1 种:通用 PCR 技术。

        原理

        通用 PCR 的基本原理:

        常规 PCR 技术的基本原理是以扩增的目的基因 DNA 分子为模板,必须釆用针对特定目的基因的特异性引物,在 DNA 聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸至完成新的 DNA 的合成。通用 PCR 作为一种 PCR 相关的技术,通过针对不同种类病原体保守区基因的通用引物,能一次性扩增该组病原体的所有靶基因片段。与常规 PCR 一样,通用 PCR 主要过程包括样品总 DNA 的提取、引物设计、PCR 扩增及扩增产物的分析。它的特点是釆用了通用引物。通用引物是一段人工合成的寡核昔酸序列,能互补于不同生物体类群 DNA 序列共有的保守区,用于作为 PCR 的引物扩增一类生物体中几乎全部成员的核内或细胞器内某个特定基因片段。

        应用

        通用 PCR 的常用应用领域如下:

        (一)医学微生物的检测、鉴定和分型物种亲缘关系鉴定

        (二)医学病原体的分类与快速鉴定

        (三)传统培养难以培养的微生物和未知菌的鉴定

        来源:丁香实验团队

        操作方法

        通用 PCR 技术

        通用 PCR 技术,英文名是 universal PCR,是由 Mullis 等在 1983 年建立的 PCR 技术,已成为分子生物学、遗传学等学科研究领域的经典实验方法。近年来,该技术本身获得了长足发展,可靠性不断提高,在 PCR 基本原理的基础上,发展了一系列新的概念和实验方法,在生命科学研究中具有重要价值。随着该技术应用的普及和深入,某些问题也越来越突出。其中问题之一是引物,引物设计的合理与

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