竞争性 RT-PCR: 拷贝数的评估

实验分类：

PCR 技术

最新修订时间：2022-02-10

简介

在预实验中，对样品和竞争子应分别做反转录，然后，不变的这种样品反转录产物的量与竞争子反转录产物 2 的对数倍稀释的量相结合，用于 PCR，这种方法可以确定样品的最适拷贝数。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

来源：丁香实验

操作方法

竞争性 RT-PCR: 拷贝数的评估

第一部分：单链 cDNA 的合成一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂去除 RNA 酶的双蒸水 10XRT-PCR 缓冲液（100 mmol/LTris-HCl、pH8.3,500 mmol/LKC1，15 mmol/LMgCl2) 2. 酶和酶缓冲液 MMLV 逆转录酶（100~200U/ul) SUPERaseIN(20U/ul,Ambion) 3. 核酸和寡核苷酸 dNTP