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- 提供商:
菲优特
- 服务名称:
mRNA定量PCR检测|miRNA定量PCR检测|DNA拷贝数检测|绝对相对定量PCR服务
- 规格:
项
荧光定量PCR(real time PCR) 是1996 年由美国AppliedBiosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料,即常用SYBR Green染料法或Taqman探针法。对初始模板定量有两种策略,相对定量法和绝对定量法。
服务项目
mRNA定量PCR检测
miRNA定量PCR检测
DNA拷贝数检测
绝对定量PCR服务
相对定量PCR服务
样品类型:组织、细胞、血液、其他样本类型
mRNA定量PCR检测服务内容
(1)引物设计及引物合成;
(2)RNA抽提;
(3)进行逆转录;
(4)定量PCR检测各个样品mRNA的表达量。
miRNA定量PCR检测服务内容
(1)引物设计及引物合成;
(2)MicroRNA抽提;
(3)根据不同方法选择,进行逆转录;
(4)采用Poly(A)加尾法或者茎环法,检测各个样品miRNA的表达量。
DNA拷贝数检测服务内容
(1)引物设计及引物合成;
(2)DNA抽提;
(3)定量PCR检测各个样品DNA的拷贝数。
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文献和实验老板给定了一课题,希望能通过定量PCR来检测一病原真菌对药剂的抗药性。该病原真菌的抗药性由其β-维管蛋白基因的881位的点突变引起。该菌抗药性β-维管蛋白
最近楼主才回来,由于很长时间不做这方面的工作了,很多新概念和新方法可能跟不上大家了,说的不对请见谅啊。感谢大家的踊跃发言。最近看到很多战友在做miRNA的荧光定量PCR检测试验。也没看见有专门的讨论帖,拿自己以前做的试验晒晒。开个帖子欢迎大家来提问题、讨论。 另外希望各位战友有用没用千万看贴回个贴阿,以免此帖沦丧无尽之海。:D:D:D:D 目录如下:一、MiRNA简介二、反转录引物分类以及设计原理三、引物探针设计四、试验操作流程1、RNA提取2、反转录3、荧光定量PCR一、miRNA简介
1. 样品制备20-50 mg食品及标准品研磨成粉,按以下方法抽提DNA:PrepMan Ultra Sample Preparation Reagent (AB, 4318930), DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen)2. SDS检测板设置Plate类型: Single Reporter, Real Time。FAM层: 未知样品、标准品、对照均设定为UNKN;不同类型的检测孔可在Sample Name栏以不同名称相互区分。命名请参照以下规则:标准
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