PCR 技术

下面的程序详细叙述了高 GC 含董片段的 PCR 扩增。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

在 PCR 扩增过程中将 dUTP 掺入复制子是最为有效和广泛使用的净化 PCR 产物的方法（Longoetal.1990;HartleyandRashtchian1995)。下面介紹这一方法的详细操作过程。本实验来源于PCR实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。

引物延伸分析用于确定位置和定量特定RNA的5'-端的数量。结束标记的寡核苷酸杂交，RNA和利用中存在的脱氧核苷酸逆转录作为底漆。因此RNA的反转录成cDNA，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。cDNA的长度反映了基地之间的标记引物和RNA的5'-端核苷酸的数量，基因产品的数量是针对性的RNA的量成正比。

限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）分析技术是分子生物学的重要分析方法之一 ，主要用于（1）检测DNA序列多态性，（2）探索基因的多样性。

聚合酶链式反应-单链构象多态（Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism，PCR-SSCP）技术可用于：（1）癌基因和抑癌基因突变的筛查检测；（2）遗传病的致病基因分析；（3）基因诊断，基因制图等领域。

逆转录-聚合酶链反应可应用于：(1）分析基因的转录产物；（2）获取目的基因；（3）合成cDNA探针；（4）构建RNA高效转录系统。