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        从 M13 噬菌体模板合成非固定长度的单链 DNA 探针

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        在合成过程中,低浓度的放射性标记的 dNTP 使探针的长度限制为 200~300 个核苷酸。但是新合成的 DNA 可通过改变投入的模板量和 dNTP 的浓度使其长度为 100~1000 个核苷酸,如此长度范围内的探针适用于大多数杂交实验。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        从M13噬菌体模板合成非固定长度的单链DNA探针

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 洗脱缓冲液(1X SSPE 含 0.5% SDS) 甲酰胺染色缓冲液 MgCl2 ( 1 mol/L) NaOH (10 mol/L) 3X 探针合成缓冲液(dATP、dTTP 和 dGTP ( 各 62 pmol/L),0.5 mg/ml 牛血清白蛋白(组分V,Sigma 公司),625 μmol/L DTT,32 mmol/L Tris-Cl (pH

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