应用 PCR 的遗传工程

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本方案（由德克萨斯大学西南医学中心的 Andereson 提供）叙述在克隆化的哺乳动物 cDNA 的 5' 与 3' 端同时导入限制性内切核酸酶酶切位点，有时在此 cDNA 5' 末端，改变部分密码子为大肠杆菌的偏爱密码子等。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

应用 PCR 的遗传工程

一、材料 1. 缓冲液和溶液 10X 扩增缓冲液 4 种 dNTP 贮存液（20 mmol/L, pH 8.0) 2. 酶与缓冲液合适的限制性内切核酸酶热稳定 DNA 聚合酶 3. 凝胶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 4. 核苷酸与寡聚核苷酸寡核苷酸引物 1 与引物 2 均溶于 TE ( 10 μmol/L, pH 8.0) 阳性对照 DNA 模板 DNA 5. 载体