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        琼脂糖凝胶栓中 DNA 的限制性内切核酸酶消化

        实验分类:

        DNA 实验

        最新修订时间:

        简介

        从哺乳动物细胞、酵母或细菌分离的染色体 DNA 在琼脂糖栓中可用所需的内切酶消化。低熔点琼脂糖栓的孔足以使内切酶进入,与作为底物的基因组 DNA 相作用。消化后,经 PFGE 分离,然后回收或做 Southern 印迹分析。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

        来源:丁香实验

        操作方法

        琼脂糖凝胶栓中DNA的限制性内切核酸酶消化

        一、材料 1. 缓冲液和溶液 1X 限制酶缓冲液 TE ( pH 7.6) 2. 酶和缓冲液 限制酶 3. 凝胶 脉冲场电泳用的凝胶 4. 核酸和寡核苷酸 包埋在低熔点琼脂糖栓中的基因组 DNA 5. 专用设备 设定在酶切最佳温度的水浴 二、方法 1. 如果凝胶栓未在 TE 中存放(如通过邮寄收到的凝胶栓或一直存放在 0.5 mol/L EDTA 中的),则在 50 倍体

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