聚丙烯酰胺凝胶中 DNA 的染色检测

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

与琼脂糖凝胶不同，聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭，因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而，电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚丙烯酰胺会猝灭溴化乙锭的荧光，所以检测 DNA 的灵敏度降低。电泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probes) 进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测

一、材料 1. 缓冲液和溶液染料溶液：溴化乙锭溶液（贮存液 0.5 μg/ml ), SYBR Gold 贮存液或亚甲蓝贮存液（0.001%~0.0025%, TAE 缓冲液配制） 2. 凝胶聚丙烯酰胺凝胶二、方法 1. 将凝胶及其附着的玻璃板轻轻地浸入需用染色液中，染色液正好将凝胶没住即可。室温染色 30~45 min。 2. 以玻璃板为支撑物将凝胶从染色液中取出，水冲洗后用