真核表达文库的构建与筛选实验

阶段一：在真核表达载体上构建 cDNA 文库 材料 缓冲液与溶液 10X 限制性内切核酸酶缓冲液 酶及缓冲液 限制性内切核酸酶 见步骤 3 核酸与寡核苷酸 通过 poly(A)+富集的 mRNA mRNA 须提取自表达目标蛋自活性的细胞或组织，并经两轮 oligo(dT)-纤维素亲和层析纯化（见第 7 章，方案 3)。鉴定目标蛋白高表达组织或细胞系的方法应与表达克隆中的筛选方法相同。