含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶的制备实验

DNA 实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在 DNA 测序中一个常见的问题是由于 DNA 二极结构的存在而造成电泳条带的压缩。一个简单直接的解决办法是在测序胶中加入甲酰胺以减少二极结构的形成。在 G/C 含量高于 55% 时，几乎是必须使用含有甲酰胺的凝胶。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。

来源：丁香实验

操作方法

含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶的制备实验

材料本方法包括方案 8 中所有物品，加上：甲酰胺（100%) 方法 1. 依方案 8 步骤 1~8 淸洗并安装玻璃板制成胶模。 2. 在实验桌的工作区上铺上衬塑料的保护纸。灌制测序凝胶时几乎不可避免将丙烯酰胺溶液滴于桌面，可准备一个大托盘对其进行收集。 3. 在一个 250 ml 有臂锥形瓶中配制适当浓度的丙烯酰胺溶液（表 12-20)。这些溶液足够配制一块 40 cmx40 cm