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- EK-Bioscience
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- 2025年07月16日
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文献和实验*发表【中文论文】请标注：由上海酶研生物科技有限公司提供；
*发表【英文论文】请标注：From Shanghai EK-Bioscience Biotechnology Co., Ltd.
如果有效果好的、适于长片段连接的方法，也请大家指教，多谢。 zitong1983 看了下你的情况，我有几个问题 1）为什么选用BamH1和EcoR1两个酶切位点？ 从pcDNA3.1+载体图谱上看，这两个酶切位点相隔太近，你用双酶切载体制备vector的时候，如何确保两个位点的酶切充分完全？我的建议是，如果不想换酶切位点，线性化载体的时候就采用单酶切的方法，先切EcoRI，取少量产物跑胶确定已经线性化，再切BamHI，胶回收酶切
zhangyuxianggx 各位大侠好！现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上，老师就说让构建载体，具体是什么意思啊？我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒，但是不知下一步该怎么做？恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
xxzjcg 请教构建载体，插于片段670bp，pcDNA3.1质粒5400bp，如果10ul连接体系，插于片段加多少？pcDNA3.1加多少？ woxingwosu pcDNA3.1：片段约为1：3至1：4，其他的成分按照要求来做。 xxzjcg 可是我做了1：4加的，长出几个菌，但菌落PCR是阴性的，请教可能什么原因 cixinkejian 确认下你的
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