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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
T4 Polynucleotide Kinase
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
500 U/2500 U/10000 U
| 规格: | 500 U | 产品价格: | ¥265.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2500 U | 产品价格: | ¥575.0 |
| 规格: | 10000 U | 产品价格: | ¥2198.0 |
T4 Polynucleotide kinase是一种多聚核苷酸5’-羟基激酶,能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或者RNA)的5’-羟基末端以及3’-单磷酸核苷上,并且该反应是可逆的。具有3’-端磷酸酶活性,将3’-磷酸基团从寡核苷酸的3’-磷酸末端、脱氧3’-单磷酸核苷和脱氧3’-二磷酸核苷上水解。当ADP存在时,T4PNK具有5’-端磷酸酶活性,催化5’-P-寡聚/多聚核苷酸和ATP末端5’-磷酸基团交换。
应用场景:
- DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化,以便进行连接反应;
- DNA 或 RNA 的末端标记,用作探针和进行 DNA 测序;
- 将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化,制备pNp 底物,用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端;
- 对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记。
1. 辅因子:反应需要Mg2+和SH试剂如DTT的参与
2. 抑制剂:7 mM的磷酸、焦磷酸盐或磷酸钠能够抑制酶50%的活性,7 mM的硫酸铵抑制酶75%的活性。
干冰运输。-20℃保存,有效期1年。
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文献和实验Polynucleotide Kinase (EC 2.7.1.78)
The enzyme polynucleotide kinase (PNK, or ATP:5′-dephospho-polynucleotide 5′-phosphatase) catalyzes the transfer of a γ-phosphate group from a 5′-nucleoside triphosphate moiety to a free 5′-hydroxyl of a polynucleotide such as DNA or RNA, to form
Preparation of End-Labeled DNA Probes by Conventional Kinase for DNA Footprinting Analysis
1 μl of γ-[32 P]-ATP (CAUTION! see Hint #1) 1 μl of T4 Polynucleotide Kinase enzyme Total volume is 40 μl. 2. Incubate at 37°C for 25 min. 3. Add another 0.5 μl of T4 Polynucleotide Kinase enzyme
1 ul DNA x ul [[gamma]]-[32-P]-rATP 10 uCi T4 polynucleotide kinase 1 ul (3U/ul) 10 ul [[gamma]]-[32-P]-rATP (35020) ICN and T4 polynucleotide kinase (70031) from United States Biochemicals. 2. Incubate at 37degC
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