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脱氢酶(DHA)生化试剂盒

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  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Dehydrogenase (DHA) test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50管/48样

    产品细节图片1
    脱氢酶(dehydrogenase, DHA)试剂盒说明书
    分光光度法 50 管/48 样注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义

    脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶,催化底物通过细胞色素系统被氧化,释放的能量供机体使用,是生物体取得能量的一种方式。

    测定原理

    在细胞呼吸过程中,氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脱氢酶作用下接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl  Formazone,  TF),TF呈现红色,于 485nm 测定其吸光值,即得脱氢酶活性。

    自备实验仪器及用品

    天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、甲醇(不允许快递,请用户自备)。

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    产品细节图片2产品细节图片3

    试剂的组成和配制

    试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加入 30mL 蒸馏水溶解(现配现用)。试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂四:甲醇,自备。

    样品处理

    取新鲜根系样本,洗净后称取 0.1g,放入 10mL 离心管中。

    测定步骤和操作表

     
      空白管 测定管
    样品(g)   0.1
    试剂一(mL) 1 1
    试剂二(mL) 1 1
    充分混匀,37℃避光培养 2h
    试剂三(mL) 0.4 0.4
    混匀,然后取出根样,吸干样本表面水分,放入新的离心管
    甲醇(mL) 2 2
    40℃浸泡 2h,若样本仍带红色则继续浸泡至样本完全变白,取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿,测
    定 A485,△A=A 测定-A 空白。
    脱氢酶活力计算
    标准曲线:y = 0.0422x - 0.0312;R2 = 0.9988;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。酶活单位定义:在 37℃时,每克样品每 min 催化产生 1μgTF 为一个酶活性单位。
    DHA(μg/ min /g 鲜重)=(△A+0.0312)÷ 0.0422×V 反总÷W÷T= 0.395×(△A+0.0312)÷W V 反总:反应总体积,2mL;T:培养时间,120min;W:样品质量,g。

    产品细节图片4

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