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- XK-SJH-A179
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
69
- 英文名：
Amino acid (AA) content test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
分光光度法 50 管/48 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。测定原理：氨基酸的 α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在 570 nm 有特征吸收峰；通过测定 570 nm 吸光度，来计算氨基酸含量。
自备仪器及用品：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、无水乙醇、冰和蒸馏水。试剂组成和配制：
试剂一：液体 60 mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：粉剂×1 瓶（棕色），4℃避光保存。临用前加入 2 mL 无水乙醇，盖紧后充分混匀，再加入 28 mL 试剂二混匀，避光保存。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 5 mL 试剂二，充分溶解。样品中 AA 提取：
- 按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行室温匀浆，8000g，4℃离心 10min，取 200μL 上清转移到 1.5 mL EP 管中，加入 200μL 试剂二盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴 15 min，冷却至室温后待测。
- 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
- 血清等液体：取 200μL 转移到 1.5 mL EP 管中，加入 200μL 试剂二盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴 15 min，冷却至室温后待测。
测定操作：
- 分光光度计预热 30 min，调节波长到 570 nm，蒸馏水调零。
- 取 EP 管，加入 50μL 待测液，500μL 试剂二，500μL 试剂三和 50μL 试剂四，混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 15 min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，于 570nm 测定吸光值，记为A 测定管。显色后务必在 30min 内测完。
氨基酸含量计算公式：
使用比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 0.0054x + 0.0737 R2 = 0.9994 x：亮氨酸标准品浓度（μg/mL）
y：吸光值A
- 按蛋白浓度计算
=370.4×(A 测定-0.0737)÷Cpr
- 按样本质量计算
=370.4×(A 测定-0.0737)÷W
- 按细胞数量计算
=370.4×(A 测定-0.0737)÷细胞数量
- 按照液体体积计算
=370.4×(A 测定-0.0737)
W：样品质量，g；V 样：反应体系中加入样品提取液体积，0.05 mL；V 样总：样品提取液总体积，1mL；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL。
注意事项：
- 试剂盒中试剂三、试剂四均需临用前配制，且避光保存，配制好未使用完的 4℃保存且 3
- 为保证实验结果的准确性，需先取 1-2 个样做预实验，如果测定的吸光值过高（高于 2.5） 或者检测时吸光值下降很快，用试剂二稀释后再测定。
- 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在 570nm 处无吸收峰，因此，570nm 处测定结果不含这两种氨基酸的量。
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文献和实验针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
摘自张迺衡编著的（北京医科大学，第二版) 1. 用紫外吸收法测定溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？ 色氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸在280nm附近有最大吸收，多数蛋白含有这tyr， trp残基。所以在紫外分光中用280nm对它们进行检测。 2. 氨基酸有哪些成色反应？哪些是肽，蛋白质共有的？各有什么用途？ 氨基酸的成色反应有茚三酮反应，丹磺酰氯，FDNB成色反应。 蛋白质的成色反应有：双缩脲反应，。其中，FDNB
这是我整理得生物化学资料， 今年考北大生物化学考绩不错。 希望斑竹加精。 张迺衡编著的（北京医科大学，第二版) §§§蛋白质的化学 1. 用紫外吸收法测定溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？ 色氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸在280nm附近有最大吸收，多数蛋白含有这tyr， trp残基。所以在紫外分光中用280nm对它们进行检测。 2. 氨基酸有哪些成色反应？哪些是肽，蛋白质共有的？各有什么用途？ 氨基酸的成色反应有茚三酮反应，丹磺酰
