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- Xkbio
- XK-SJH-A715
- 国产
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Laccase kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
漆酶（Laccase）试剂盒说明书
微量法 100T/48S
漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理
漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基，在 420nm 处的吸光系数远大于底物 ABTS，测定ABTS 自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加 15mL 试剂一溶解；用不完的试剂 4℃保存一周。
酶液提取
1． 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 30min，取上清，置冰上待测。 2． 细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500
万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
- 细胞培养液：直接检测。
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注意：
1、 极少数样本在 60℃水浴 20min 后会出现沉淀，可经过 8000g 25℃离心 10min 后，取上
清检测，例如成熟的水稻叶片样本。
2、 为确保检测准确性，若ΔA 大于 1，将样本用提取液稀释 2~10 倍后重新检测，计算公式乘以相应稀释倍数。
酶活性计算公式
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- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
DA
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- 按照样本质量计算
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DA
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- 按照细胞数量计算
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细胞数量
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- 按照液体体积计算
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DA
×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T= 9.26×△ A÷
DA
ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积， 0.3mL；V 样：反应体系中样本体积，0.03mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，20min
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- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
DA
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- 按照样本质量计算
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DA
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- 按照细胞数量计算
-
DA
×V 反总÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T
= 18.52×△ A÷细胞数量
-
-
- 按照液体体积计算
-
DA
ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V 反总：反应总体积， 0.3mL；V 样：反应中样本体积，0.045mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T：反应时间，20min
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文献和实验DNA提取试剂盒； EcoRI酶,MseI酶，T4连接酶试剂盒； Taq酶，dNTP, PCR reaction buffer； AFLP引物； 琼脂糖电泳试剂：琼脂糖，无毒GeneFinder核酸染料替代传统EB染料； 超纯水（18.2MΩ·cm） 2．其他实验需要物品 微量移液枪（一套）及相应尺寸Tip头,PCR管,冰浴等。 四
光波，并把紫外光转变成波长较长的可见光波而反射出来的染料。这类染料如荧光黄、酸性曙红、红汞和某些分散染料等。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料具有闪光的鲜艳色彩，除用于纤维织物的印染外，还可以作特种标志（如暗处符号）和军事追踪用。 发光漆 又叫荧光涂料，是能发出荧光或磷光的漆，由发光颜料和中性清漆（如聚醋酸乙烯清漆、聚丙烯酸酯清漆等）配制而成。加入痕量的镭或铀等放射性物质，能延长发光的时间。这种漆用于涂刷仪表、公路路标、机械设备、防火设备和防空走道等，也可用于涂刷钟表
借助氧将对苯二酚（氢醌）氧化成对苯醌的酚氧化酶的一种，亦称为对苯二酚氧化酶。田彦六郎（1883）在漆树的树液中发现能使“树漆”氧化硬化的酶，后来贝特兰德（ G． E． Bertrand， 1894）详细地研究了东南亚产的漆中的酶，命名为漆酶。也分布于微生物、菌类中。是一种铜蛋白质，蓝色，分子量约 12万，含 4原子铜。可被 CN-抑制。在漆树的永延液汁中可被此酶氧化变成黑色色素的物质是漆酚、氢化漆酚等。
