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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Monoamine oxidase test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

单胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎动物的各种器官,特别是分泌腺、脑、肝脏,在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在催化单胺类物质代谢,含量较低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纤维化的程度。此外,MAO 活性异常导致细胞内单胺类神经递质运转出现紊乱, 从而引发多种病症。
测定原理
MAO 催化单胺类底物脱氨生成相应的醛,进一步氧化成酸;底物在 360nm 处有特征吸收峰, 测定 360nm 光吸收下降的速率,计算 MAO 活性。自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。试剂组成和配制
提取液一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。提取液二:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃避光保存。粗酶液提取- 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,
- 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 10min,弃沉淀;把上清转移到另一预冷的离心管,10000g,4℃,离心 30min,弃上清;加入 1.0 mL 预冷的提取液二,震荡混匀,16000g,4℃,离心 40min,弃上清;沉淀加入预冷的 1.0 mL 试剂一,震荡混匀, 即粗酶液(可用于可溶性蛋白浓度测定),取上清置于冰上待测。
- 血清:直接测定。

测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min,调节波长至 360nm,蒸馏水调零。
2、操作表
| 空白管 | 测定管 | |
| 酶液(µL) | 100 | |
| 试剂一(µL) | 900 | 800 |
| 试剂二(µL) | 100 | 100 |
| 混匀,立即测定 360nm 处测定管和空白管吸光值,分别记为 A1 和A2;然后 37℃反应 60min, 再次测定 360nm 处测定管和空白管吸光值,分别记为 A3 和A4;计算ΔA=(A1-A2)-(A3-A4) |
||
注意:空白管只需测定一次。
1、按蛋白含量计算
酶活定义:37℃,pH7.6 时,每毫克蛋白质 1min 内转化 1nmol 底物的酶量为一个酶活单位。DA
2、按样本质量计算
酶活定义:37℃,pH7.6 时,每克样品 1min 内转化 1nmol 底物的酶量为一个酶活单位。DA
3、按照细胞数量计算
酶活定义:37℃,pH7.6 时,每 104 个细胞 1min 内转化 1nmol 底物的酶量为一个酶活单位。DA
e ´ d
×V 反总÷(V 样÷V 样总×细胞数量)÷T
= 114×ΔA÷细胞数量
4、按照液体体积计算
酶活定义:37℃,pH7.6 时,每 mL 血清 1min 内转化 1nmol 底物的酶量为一个酶活单位。DA
ε:底物摩尔消光系数,1460 L/mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL; V 样:反应中样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度, mg/mL;T:反应时间,60min,W:样本质量,g
注意事项
1、吸光度变化应该控制在 0.01~0.8 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。2、样品蛋白质含量需要另外测定。
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文献和实验1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活,必须了解酶催化反应总的反应式,而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量,使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
素的形成,减轻白癜风症状。 3、医药用作甲状腺功能亢进;食品添加剂 。 4、是一种重要的生化试剂,是合成多肽类激素、抗生素、L-多巴等药物的主要原料。 5、广泛用于农业科学研究,也作饮料添加剂和配制人工昆虫饲料。 6、由于酪氨酸有刺激和抗抑郁的作用,早上和午餐前配合服用1000到1500毫克的色氨酸(色氨酸使人平静)那么在晚上它对减轻抑郁会有很好的治疗效果。研究者发现,对于某些人群,色氨酸和酪氨酸一起使用,比酪氨酸或者是色氨酸单独使用,对于减轻抑郁
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