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- XK-SJH-A680
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
Soil alkaline xylanase test kit/soil alkaline hemicellulase test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100T
土壤碱性木聚糖酶（Soil Basic Xylanase，S-BAX）测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。
测定原理
BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 BAX 活力。自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。试剂组成和配制
缓冲液：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。样品处理
新鲜土样风干，过 30-50 目筛。
测定操作表
| 对照管 | 测定管 | |
| 土样（g） | 0.1 | 0.1 |
| 缓冲液（μL） | 600 | 400 |
| 试剂一（μL） | 200 | |
| 混匀，50℃震荡反应 30min，立即 90℃水浴 10min，8000g，25℃离心 10min，取上清 500μL | ||
| 试剂二（μL） | 500 | 500 |
| 混匀，90℃水浴中显色 5min，1mL 玻璃比色皿测定 540nm 处吸光值 A，分别记为 A 对照管、 A 测定管，△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 相关图片：   |
||
标准曲线：y = 2.8432x - 0.0293，R2 = 0.9985
酶活定义：50℃，pH9.0 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-BAX 活力（μmol/d/g 土样）=（△A +0.0293）÷ 2.8432×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
= 67.53×（△A +0.0293）÷ W
V 反总：反应总体积，0.6mL；T：反应时间，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。
注意事项
- 保证震荡反应 30min，使酶与底物充分接触。
- 注意 90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。
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文献和实验剂（1% Ignite Hoechst-Roussel Agri-Vet Company, NJ) ( 5 ) 蛋白提取缓冲液：50 mmol/L 磷酸钠缓冲液（pH 7.0 ) ，10 mmol/L EDTA(乙二胺四乙酸）， 0.1% (V/V) Triton X-100，0.1% (m/V ) Sarkosyl，10 mmol/L 疏基乙醇，10 mmol/L PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride)。 ( 6 ) 碱性
搅拌和加热有助于样品均一化，缩短平衡时间。对顶空固相微萃取(HS－SPME)加热可提高液面上易挥发有机化合物的浓度，而提高萃取效率。� 1.3.4 无机盐� 向样品中加入(NH�4) 2SO�4，Na2SO�4，NaCl和K�2CO�3等无机盐可降低有机化合物与基质的亲和力而提高萃取效率。� 1.3.5 pH缓冲溶液� 萃取酸性或碱性物质时，通过调节样品的pH值可改善组分的亲脂性，从而大大提高萃取效率。� 1.4 固相微萃取操作模式�
气相色谱柱和检测器进行分离和测定。很明显,固相微萃取技术存在如下优点:纤维的几何形状加快了萃取和解析过程中溶质的传质速度,有利于快速平衡,节省分析时间;纤维涂层厚度很薄,可在一定程度上克服堵塞现象;解析方式是热解析,不使用有机溶剂,所以固相微萃取是一种无溶剂的对环境友好的分离富集技术。固相微萃取保留了固相萃取(SPE)的大部分优点,又克服了固相萃取的一些缺点,它将取样、萃取、富集分离和进样结合为一体,特别适合于水样中挥发性及半挥发性物质的分离富集。因而SPME-GC研究很多,应用广泛。显而
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