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土壤碱性木聚糖酶测试盒/土壤碱性半纤维素酶测试盒

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  • XK-SJH-A679
  • 国产
  • 2025年07月18日
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      100

    • 英文名

      Soil alkaline xylanase test kit/soil alkaline hemicellulase test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100T

    产品细节图片1

    土壤碱性木聚糖酶(Soil Basic Xylanase,S-BAX)测定试剂盒说明书

    微量法 100T/48S

    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义:

    木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。

    测定原理:

    BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 BAX 活力。

    自备实验用品及仪器:

    天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。

    试剂组成和配制:

    缓冲液:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂一:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。样品处理
    新鲜土样风干,过 30-50 目筛。

    测定操作表:

    1、 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 540nm。
    2、操作表
      对照管 测定管
    土样(g) 0.02 0.02
    缓冲液(μL) 150 100
    试剂一(μL)   50
    混匀,50℃震荡反应 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃离心 10min,取上清 100μL
    试剂二(μL) 100 100
    混匀,90℃水浴中显色 5min,取 180μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 540nm 处吸光值A,
    分别记为A 对照管、A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3

    S-BAX 计算公式:

    1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985
    酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
    S-BAX 活力(μmol/d /g 土样)=(△A+0.0293)÷ 2.8432×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
    = 16.88×(△A +0.0293)÷ W
    V 反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150: 木糖分子量。
    1. 用 96 孔板测定的计算公式如下
    标准曲线:y = 1.4216x - 0.0293,R2 = 0.9985
     
    酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
    S-BAX 活力(μmol/d /g 土样)=(△A+0.0293)÷ 1.4216×V 反总×103÷ W÷T÷ 150
    = 33.76×(△A +0.0293)÷ W
    V 反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150: 木糖分子量。

    注意事项:

    1. 保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。
    2. 注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
    产品细节图片4

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