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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
细胞系
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
100
- 英文名:
HVSMC
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
长期
- 运输方式:
冻存/复苏
- 器官来源:
血管平滑肌细胞
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮样
- 免疫类型:
否
- 物种来源:
血管平滑肌
- 相关疾病:
详询
- 组织来源:
平滑肌
适用范围:
本产品仅限于科学研究,绝不可作为人类或者动物疾病的治疗产品使用。
细胞特性:
1) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
2) 含量:>1x10^6
3) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
4) 来源:见说明
5) 形态:请直接向我司客服索取
1)运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
1.干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
2.存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
3.收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞接受后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的的完全培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
ATCC是全球首屈的生物材料资源和标准组织,其使命主要集中在标准参考微生物,细胞系和其他材料的获取,鉴定,生产,保存,开发和分销。在保持传统收集材料的同时,ATCC开发出高质量的产品,标准和服务,以支持改善全球人口健康的科学研究和突破。
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文献和实验最近第一次养细胞就养成功了,非常高兴,发上来跟大家分享 养细胞主要是 无菌 ,我用得是组织块消化法,首先要把培养用的DMEM和PBS 用过滤法抽吸式过滤一下,取材时注意无菌,150克的大鼠用7毫升的1%戊巴比妥消毒,用DMEM反复清洗,用眼科剪刮去外膜,剪开血管,用棉签刮去内膜的脂滴,再用眼科剪剪成碎块,铺到培养瓶里,均匀铺开,滴少许含20%FCS的DMEM湿润一下,然后再加3---5毫升的DMEM(含20%FCS)到培养瓶内,使铺组织块的一面向上,放到孵育箱里,约5个小时
Isolation of renal vascular trees and culture of the vascular smooth muscle cell 1. Male Wistar rats of about 250 g body wt were anesthetized with ether and were decapitated. 2. Kidneys and thoracic aorta were removed, rinsed
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
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