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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
β-Glucuronidase (β-GD) kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GD)试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义
β-GD 广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液 β-GD 活性对于研究胃癌具有重要的意义。测定原理
β-GD 催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 2mL 蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍
-20℃保存;
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:1μmol/mL 标准储备液 10mL,4℃保存;
样品测定的前处理
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。2、样本测定
| 试剂名称(μL) | 加样孔 | ||
| 测定管 | 标准管 | 空白管 | |
| 试剂一 | 20 | 20 | 20 |
| 试剂二 | 20 | 20 | 20 |
| 样本 | 10 | ||
| 1μmol/mL 标准液 | 10 | ||
| 蒸馏水 | 10 | ||
| 试剂三 | 150 | 150 | 150 |
注意:标准管和空白管只需测一次。
相关图片:

β-GD 活性计算
- 按样本鲜重计算:
β-GD(μmol/h/g 鲜重)= (C 标准管×V1)×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
- 按样本蛋白浓度计算:
β-GD(μmol/h/mg prot)= (C 标准管×V1)×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
÷(V1×Cpr)÷T=2×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
C 标准管:标准管浓度, 1μmol/mL;V1:加入样本体积:0.01mL;V2:加入提取液体积, 1mL;T:反应时间,0.5h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
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