- ￥1980
- Xkbio
- XK-SJH-A146
- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Fatty acid synthase (FAS) test kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
25管/24样
分光光度法 25 管/24 样
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
FAS 是脂肪酸合成关键酶，催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍表达于各种组织细胞中，在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。测定原理：
FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和NADP+；NADPH 在 340nm有吸收峰，而 NADP+没有；通过测定 340nm 光吸收下降速率，计算 FAS 活性。
自备仪器和用品：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。试剂组成和配制：
试剂一：液体 25mL×1 瓶，－20℃保存。用前 1 d 取出置于 4℃充分解冻后混匀。试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 550 μL 试剂四，充分溶解，用不完的试剂分装
后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 550 μL 试剂四，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：液体 25mL×1 瓶，4℃保存。
试剂五：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 1050 μL 试剂四，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
粗酶液提取：
- 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。12000g，4℃离心 40min，取上清置冰上待测。
- 细菌、真菌：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7秒，总时间 3min）；然后 12000g，4℃，离心 40min，取上清置于冰上待测。
- 血清等液体：直接测定。
FAS 测定操作：
- 分光光度计预热 30min，调节波长到 340 nm，蒸馏水调零。
- 试剂四置于 40℃水浴中预热 30 min。
- 测定管：在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μL 上清液、20μL 试剂二、20μL 试剂三、820μL 试剂四和 40μL 试剂五，迅速混匀后于 340nm 处测定吸光值，记录第 30s 和 90s 时吸光值， 分别记录为 A1 和 A2。△A 测=A1-A2。
FAS 活性计算公式：
- 按照蛋白浓度计算
FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V 反总×109) ÷(Cpr×V 样)÷T
=1608×△A÷Cpr
- 按照样本质量计算
FAS(nmol/min/g 鲜重) = (△A÷ε÷d×V 反总×109) ÷(W×V 样÷V 样总)÷T
=1608×△A ÷W
- 按细胞数量计算
FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V 反总×109) ÷(细胞数量×V 样÷V 样总)÷T
=1608×△A ÷细胞数量
- 按液体体积计算
FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V 反总×109) ÷V 样÷T
=1608×△A
ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×103/mol/cm；d：比色皿光径，1 cm；V 反总：反应体系总体积，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V 样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1 mL；T：反应时间，1min。
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文献和实验脂肪酸合成酶 fatty acid synthetase 乙酰 CoA ＋ 7 丙 = 酸 CoA ＋ 14NADPH ＋ 14H →棕榈酸 7CO 2 ＋ 8CoA 14NADP 6H 2 O 。 催化上述反应的酶称为脂肪酸合成酶，不过酵母酶的最终产物是棕榈酸 CoA 。如图所示，在丙二酸基和乙酰基缩合时，在每次延长 C 2 单位的同时发生还原反应，在这个复杂的反应中，各有相应的酶参与作用。而酰基以 CoA 转移到酰基载体
Cell Rep Med：赵健元/孙锟/曹婧/周翔宇合作团队发现孕期高棕榈酸致子代先天性心脏病的机制
酸和亚油酸水平的与先心病发生呈正相关关系。为确定是哪种脂肪酸诱导了心脏发育异常，团队使用上述脂肪酸饲喂孕鼠，并统计其子代先心病的发病情况。实验结果显示，高棕榈酸饲喂的子代出现了明显 ASD 和 VSD 表型，而其他脂肪酸饲喂的子代则未观察到先心病的表型，提示棕榈酸是导致心脏发育异常的致病代谢物。 在机制研究中，通过体外生化、分子细胞和小鼠模型不同层次的研究，我们发现棕榈酸可特异的通过 NF-κB 通路激活甲硫氨酰 tRNA 合成酶（MARS）的表达及其催化赖氨酸同型半胱氨酸修饰（K-Hcy）水平
赐教！！ lwjssry 要排除死亡受体途径检测一下caspase-8，如果caspase-8没有激活就可以了 月朗渔 谢谢! 我还想问下caspase-8、caspase-9和caspase-3如何检测？在这方面我还是新手，对于各种检测方法还比较陌生，不知道哪种方法更好些？ lwjssry 用western或者用活性检测试剂盒。 月朗渔 好的，谢谢！
