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- Xkbio
- XK-SJH-A524
- 国产
- 2025年07月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Neutral Xylanase Assay Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
中性木聚糖酶（Neutral Xylanase，NEX）测定试剂盒说明书
微量法100T/48S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX 一般分离自最适生长pH 为 6-8 的微生物。测定原理：
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨中发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 NEX 活力。自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。试剂组成和配制：
缓冲液：液体 65mL×1 瓶，4℃保存。试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。（若出现白色絮状或颗粒状沉淀，可 60℃加热溶解后使用）。
试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
粗酶提取：
- 发酵液：发酵液于 8000g，4℃，离心 15min，取上清，作为待测样品。
- 酶干粉：称约 0.1mg，加 1mL 缓冲液溶解待测。
- 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g
测定操作表：
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 540nm。2、操作表
| 对照管 | 测定管 | |
| 样品（μL） | 60 | 60 |
| 缓冲液（μL） | 90 | 90 |
| 试剂一（μL） | 60 | |
| 试剂二（μL） | 90 | |
| 混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应 30min，立即沸水浴 20min 灭活。(注意不要让盖子爆开， 以免进水，改变了反应体系) |
||
| 试剂一（μL） | 60 | |
| 试剂二（μL） | 90 | |
| 混匀，沸水浴显色 5min，取 200µL 于微量石英比色皿/96 孔板中 540nm 处测定吸光值A， 计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。 相关图片：   |
||
NEX 计算公式：
-
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989
- 按液体体积活力计算：
NEX 活力（nmol/min/mL）= （ΔA-0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6
= 657× ( ΔA-0.0058)
- 按蛋白浓度计算：
NEX 活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷Cpr
= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷Cpr
- 按鲜重计算：
NEX 活力（nmol/min/g 鲜重）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷W
= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V 反总÷V 样=300µL÷60µL=5 ；
106：转化因子，即 1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
-
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按液体体积活力计算：
NEX 活力（nmol/min/mL）= （ΔA-0.0058）÷0.8452÷150÷T ×稀释倍数×10 6
= 1315× ( ΔA-0.0058)
- 按蛋白浓度计算：
NEX 活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA -0.0058）÷0.8452÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷Cpr
= 1315×(ΔA -0.0058 ) ÷Cpr
- 按鲜重计算：
NEX 活力（nmol/min/g 鲜重）= （ΔA -0.0058）÷0.8452÷150÷T ×稀释倍数×10 6÷W
= 1315×(ΔA -0.0058 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V 反总÷V 样=300µL÷60µL=5 ；
106：转化因子，即 1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：
- 吸光度变化应该控制在 0.01~0.8 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
- 试剂盒 2-8℃保存，保质期 3 个月，建议尽快使用。
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文献和实验大鼠尿微量白蛋白 (ALB) 酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 本试剂盒仅供体外研究使用 ! 预期应用 ELISA 法定量测定大鼠尿液或其它相关生物液体中 ALB 含量。 实验原理 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗 ALB 抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗 ALB 抗体、 HRP 标记的 亲和素 ，经过彻底洗涤后用底物 TMB 显色
脱蜡和水化 将切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ（10 min）。 再次浸入无水乙醇Ⅰ（5 min）-无水乙醇Ⅱ（5 min）-95%酒精（5 min）-80%酒精（5 min）-70%酒精（5 min），然后去离子水冲洗2次，每次2 min。 抗原修复 (可选) 将组织切片放入修复盒，然后加入适量 0.01M 枸橼酸缓冲液（pH 6.0）或 EDTA 修复液（pH 9.0），液面要浸没组织。 微波中档修复 10 min（液体沸腾时开始计时），此过程中勿使组织干片
，分子量 272.4 。主要由卵巢卵泡 Graffian 和胎盘分泌，肾上腺少量分泌。血液中 98%雌二醇 (E2) 主要与性激素结合球蛋白 (SHBG) 结合，以及少量的血清蛋白，如白蛋白。极少一部分成为游离激素。在靶器官，雌二醇受体联合体影响雌激素活性 . 这些器官包括卵泡、子宫、乳房、阴道、尿道、丘脑下部、垂体和肝脏，皮肤也有少量。 应用 本酶联免疫吸附测定试剂盒运用竞争抑制酶标免疫分析法定量测定牛奶中 E2 含量。试剂盒中包含 96 次检测所需的酶联免疫试验试剂，包括标准
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