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- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Manganese Peroxidase (MnP) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/96样
锰过氧化物酶（Manganese peroxidase，Mnp）试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义
锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，主要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。测定原理
锰过氧化物酶在 Mn2+存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在 465nm 有特征吸收峰。自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。试剂组成和配制
试剂一：液体 110mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 2mL×1 支，4℃保存。试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂四：液体 2mL×1 支，4℃保存。
酶液提取
1. 组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，
总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
- 培养液或其它液体：直接检测。
测定操作
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 465nm，蒸馏水调零。2、 测定前将试剂一、二、三、四在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）放置 10min 以上。
3、 样本测定表
| 试剂名称（µL） | 测定管 |
| 样本 | 20 |
| 试剂一 | 100 |
| 试剂二 | 20 |
| 试剂三 | 40 |
| 试剂四 | 20 |
时的吸光值 A1 和 2min30s 后的吸光值 A2。计算ΔA＝A2-A1。
注意：若一次性测定样本较多，可将试剂一、二、三、四按比例配成混合液，在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）放置 10min 以上，测定时加入 20µL 样本和 180µL 混合液测定。
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酶活计算公式
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- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
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- 按照蛋白浓度计算
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酶活性定义：每克样品每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/g 鲜重）= [ΔA×V 反总÷（ε×d）×109] ÷（V 样×W÷V 样总）÷T= 413×ΔA÷W 3．按照细胞数量计算
酶活性定义：每 104 个细胞每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109] ÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T
= 413×ΔA÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升培养液每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/mL）= [ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T= 413×ΔA
ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积， 2×10-4 L；V 样：反应中样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，2min
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- 用 96 孔板测定的计算公式如下
- 按照蛋白浓度计算
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
酶活性定义：每克样品每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/g 鲜重）= [ΔA×V 反总÷（ε×d）×109] ÷（V 样×W÷V 样总）÷T= 826×ΔA÷W 3．按照细胞数量计算
酶活性定义：每 104 个细胞每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V 反总÷（ε×d）×109] ÷（V 样×细胞数量÷V 样总）÷T
= 826×ΔA÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：每毫升培养液每分钟氧化 1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。
MnP 活性（nmol/min/mL）= [ΔA×V 反总÷（ε×d）×109]÷V 样÷T= 826×ΔA
ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：96 孔板光径，0.5cm；V 反总：反应总体积，2×10-4 L；V 样：反应中样本体积，0.02mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，2min
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文献和实验⒈微量元素与酶的关系 酶是一种生命现象及生物化学反应的基础。人体内发现的近1000种酶中有50%-70%的酶含有微量元素或以微量元素的离子作为激活剂。已知锌与上百种酶有关，铁与数十种酶有关，锰和铜亦与数十种酶有关。钼与黄嘌呤氧化酶等有关，硒与谷胱甘肽过氧化物酶等有关。因此微量元素常作为酶的组成成分或激活剂。 ⒉微量元素构成体内重要的载体及电子传递系统 铁参与组成血红蛋白、肌红蛋白，运输和储存氧；铁构成的细胞色素系统（细胞色素b、C1、C、aa3，b5、P450等）是重要的电子
质、DNA和RNA合成中起作用。锰在自然界分布广泛，以茶叶中含量最丰富。镁的缺乏较少。若吸收过多可出现中毒症状，主要由于生产及生活中防护不善，以粉尘形式进入人体所致。锰是一种原浆毒，可引起慢性神经系统中毒，表现为锥体外系的功能障碍。并可引起眼球集合能力减弱，眼球震颤、睑裂扩大等。 五、硒 硒是人体必需的一种微量元素，体内含量约14-21mg，广泛分布于除脂肪组织以外的所有组织中。主要以含硒蛋白质形式存在。人体每日硒的需要量为50－200μg。 硒是谷胱甘肽过氧化物酶(GSH�x
佚名 人体是由几十种元素组成的，含量占人体总重量万分之一以下，每日需要量在100mg以下者称为微量元素。如铁、铜、锌、碘等41种元素，其总量约占人体的0.05%。目前公认的人体必需微量元素有铁、铜、锌、碘、锰、硒、氟、钼、钴、铬、镍、钒、锶、锡等14种，绝大多数为金属元素。在体内一般结合成化合物或络合物，广泛分布于各组织中，含量较恒定。微量元素主要来自食
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