
外泌体提取/鉴定
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- 2025年07月16日
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- 提供商:
深圳泌码科技有限公司
- 服务名称:
外泌体提取/鉴定
- 规格:
次
外泌体分离纯化服务
支持样本类型:
1、血浆/血清样本(5ml以上)
2、细胞上清液(50ml以上)
3、各类体液:尿液、唾液、脑脊液等(20ml以上)
4、部分组织支持外泌体分离纯化(详询)
超离平台:Optima XPN, Beckman Coulter
采用超速离心方法从细胞培养上清液、血清、血浆、尿液、唾液等体液中获取高纯度外泌体颗粒。依据产物纯度的不同要求,泌码科技可提供不同超离方案提纯外泌体。
超离方案
1、差速离心法
2、蔗糖垫超速离心
3、密度梯度离心
外泌体鉴定
NTA粒径分析
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文献和实验分析(NTA)和 WB marker 鉴定。 二、TEM 鉴定外泌体形态: 将提取的外泌体样本置于冰盒中,使用移液枪吸取外泌体样本于铜网上静置 1 min。(用镊子夹铜网要轻,防止铜网夹破)。再将铜网上的外泌体样本吸干,使用移液枪吸取醋酸双氧铀染色液室温染色。随后将染色完成的样本放于灯下烤。样本制好后,观察拍照,保存图片。结果如下: 图一 TEM 鉴定外泌体的形态 从 TEM 结果中可以看出,从肿瘤组织中分离得到的外泌体具有典型的杯托状结构,且数量比较多。 三
保存。 13、如何鉴定提取的外泌体? 通常会用到:透射电镜检测(形态)、NTA 粒径检测(大小)、Western Blot 检测等方法对提取的外泌体进行鉴定。在进行 Western Blot 检测时,常用的外泌体标志蛋白有CD63、CD9、CD81、TSG101 等。 14、提取的外泌体进行 Western Blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解? 需要。一般按照 1:1 的比例加入强 RIPA 试剂,或推荐使用外泌体蛋白专用裂解液。 15、进行外泌体 Western Blot 鉴定时有无内参
过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。同时,外泌体会粘附在膜上,导致产量降低。 免疫磁珠法:用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受 pH 和盐浓度影响,不利于下游实验。 试剂盒分离法:目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样,提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高,且外泌体的得率和纯度一般,不是性价比高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。 五、如何鉴定外泌体
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