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蔗糖合成酶(合成方向 SS-Ⅱ)测试盒

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  • XK-SJH-A480
  • 国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      Sucrose synthase (synthesis direction SS-Ⅱ) test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/48样

    产品细节图片1
    蔗糖合成酶(合成方向;SS-Ⅱ)试剂盒


    微量法 100 管/48 样

    正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义

    蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其合成方向 SS-Ⅱ的活性对于植物蔗糖合成具有重要意义。

    测定原理

    SS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

    需自备的仪器和用品

    可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰

    试剂的组成和配制

    提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂一:液体 2.5mL×1 瓶,-20℃保存;
    试剂二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存; 试剂三:液体 2mL×1 瓶,4℃保存
    试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:液体 6mL×1 瓶,4℃保存; 样品测定的准备:
    按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
    提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

    测定步骤

    1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。
    2、样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):
    试剂名称(μL) 测定管 对照管 标准管 空白管
    样本 10 10    
    蒸馏水   45 45 55
    试剂二     10  
    试剂一 45      
    混匀,25℃准确水浴 10min
    试剂三 15 15 15 15
    沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧,以防止水分散失),冷却
    试剂四 210 210 210 210
    试剂五 60 60 60 60
    混匀,沸水浴 30min,冷却后,取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中,480nm 下测定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。

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    产品细节图片2产品细节图片3
     
    SS-Ⅱ活性计算
    1、按照蛋白浓度计算
    单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
    SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
    2、按照样本鲜重计算
    单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
    SS-Ⅱ活性(μg /min/g 鲜重) = C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
    C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.01mL; V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T :反应时间:10min。

    产品细节图片4

     

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