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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
Sucrose synthase (synthesis direction SS-Ⅱ) test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/48样

蔗糖合成酶(合成方向;SS-Ⅱ)试剂盒
微量法 100 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义
蔗糖是源(叶片等)光合产物向“库”器官运输的主要形态。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是双向反应酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代谢的关键酶之一。研究其合成方向 SS-Ⅱ的活性对于植物蔗糖合成具有重要意义。测定原理
SS-Ⅱ催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖,蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰试剂的组成和配制
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 2.5mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存; 试剂三:液体 2mL×1 瓶,4℃保存
试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 试剂五:液体 6mL×1 瓶,4℃保存; 样品测定的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 480nm,蒸馏水调零。2、样本测定,(在 EP 管中依次加入下列试剂):
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 10 | 10 | ||
| 蒸馏水 | 45 | 45 | 55 | |
| 试剂二 | 10 | |||
| 试剂一 | 45 |
| 试剂三 | 15 | 15 | 15 | 15 |
| 试剂四 | 210 | 210 | 210 | 210 |
| 试剂五 | 60 | 60 | 60 | 60 |
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1、按照蛋白浓度计算
单位定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷Cpr
2、按照样本鲜重计算
单位定义:每 g 组织每分钟催化产生 1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/g 鲜重) = C 标准管×V1×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准管:标准管浓度,1000μg/mL;V1:加入反应体系中样本体积,0.01mL; V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T :反应时间:10min。
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