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- 库存:
100
- 英文名:
Tannin content kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

单宁含量试剂盒
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性, 如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。
测定原理:
单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在 760nm 处有最大吸收峰。需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。试剂的组成和配制:
试剂一:液体 10 mL× 1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 8 mL × 1 瓶,4℃保存;
单宁的提取:
按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水),充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min, 8000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 760nm,蒸馏水调零;试剂一和试剂二 37℃预热 10min 以上;2、操作表:
| 试剂名称(µL) | 对照管 | 测定管 |
| 样本 | 25 | |
| 蒸馏水 | 675 | 650 |
| 试剂一 | 175 | 175 |
| 试剂二 | 150 | 150 |
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单宁含量计算:
1、标准条件下测定的回归方程为 y = 1.6418x +0.0134;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为ΔA(A 测定-A 对照)。2、按样本鲜重计算:
单宁含量(mg /g 鲜重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(W×V1÷V2)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W。
3、按样本蛋白浓度计算:
单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr。
V1:加入样本体积,0.025mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。
注意:
1、 ΔA 控制在 0.02-0.8 范围内,若ΔA 大于 0.8,将样本提取上清液用蒸馏水稀释 10 倍后检测,计算公式中乘以相应稀释倍数。
2、 标准曲线线性范围为:0.025mg/mL-0.5mg/mL。
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