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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Amylopectin content test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

支链淀粉含量试剂盒说明书
微量法 100 管/96 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
支链淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。测定原理:
利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。需自备的仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、yi醚和蒸馏水。试剂的组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶;4℃保存;试剂二:yi醚 100mL×1 瓶;4℃保存;(自备) 试剂三:液体 100mL×1 瓶;4℃保存;
试剂四:液体 2mL×1 瓶; 4℃保存; 试剂五:液体 300uL×1 瓶; 4℃保存; 淀粉提取:
称取 0.01~0.02g 烘干样本(建议称取约 0.01g)于研钵中研碎,加入 1mL 试剂一,充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入1mL 试剂二(yi醚)振荡 5min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入 1mL 试剂三充分溶解,90℃水浴 10min,冷却后待测。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,蒸馏水调零。测定管:在 96 孔板或微量石英比色皿中依次加入 20uL 样本, 14uL 试剂四,120uL 蒸馏水, 2uL 试剂五,44uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 测定=A550-A743。空白管:在 96 孔板或微量石英比色皿中依次加入 20uL 试剂三, 14uL 试剂四,120uL 蒸馏水,2uL 试剂五,44uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 空白=A550-A743。
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- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24× (ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算
支链淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24
×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
- 用 96 孔板测定的计算公式如下
1、按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47× (ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算
支链淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47
×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
最低检测限为 10mg/g 干重或 0.1mg/mgprot。
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