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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Autophagy Staining Assay Kit with MDC
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50-500次/200-2000次
| 规格: | 50-500次 | 产品价格: | ¥278.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200-2000次 | 产品价格: | ¥827.0 |
细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法),即Autophagy Staining Assay Kit with MDC,是一种使用丹酰尸胺,也称单丹磺酰尸胺、丹酰尸胺或丹酰戊二胺(monodansylcadaverine, MDC)作为荧光探针快速便捷地检测细胞自噬的试剂盒。
自噬(autophagy)是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等环境条件下,细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个研究热点。
MDC是细胞自噬检测最常用的荧光探针之一。MDC可以通过离子捕获(ion trapping)和与膜脂的特异性结合,从而特异性标记自噬体(autophagosome),也称autophagic vacuole,因而常用于细胞自噬的检测。MDC是一种嗜酸性荧光探针,很多酸性膜性结构也会被MDC染色,因此MDC染色时正常的细胞也会有一定的染色背景。
本产品的染色原理决定了本产品只能用于培养的细胞或者组织的细胞自噬荧光染色检测,不能用于冻存的或固定的细胞、组织或者组织切片的染色检测。
使用本产品染色后可以通过荧光显微镜拍照观察,也可以通过荧光酶标仪或流式细胞仪进行荧光检测。荧光显微镜观察时可以使用紫外区激发光激发,发出绿色荧光。荧光酶标仪或流式细胞仪推荐的激发波长为335nm (330-360nm均可),发射波长为512nm (510-540nm均可)。
本产品用于细胞自噬染色的效果参考图1。
图1.细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)的染色效果图。A549细胞用PBS或生产的C0213 Earle's Balanced Salt Solution (EBSS)处理1h后,使用本试剂盒进行荧光染色,最后使用紫外光激发后观察绿色荧光。图中PBS或EBSS处理后出现的绿色荧光亮点即为自噬的特征性变化。本图仅供参考,实际检测效果可能会因为实验条件的不同而有所差异。
本产品如果用于6孔板或96孔板的检测,小包装分别可以检测50或500个孔,中包装分别可以检测200或2000个孔。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。其中MDC (1000X)需要避光保存。Assay Buffer (10X)可以4℃保存,至少6个月有效。
注意事项:MDC对光照特别敏感,操作过程中请尽量注意避光。
MDC (1000X)对人体有害,请注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Use of siRNA to Study the Function of MDC1 in DNA Damage Responses
Small interfering RNA (siRNA) technology has emerged as a powerful genetic tool to investigate gene function in mammalian cells. Here we use siRNA to study a mediator of DNA damage-checkpoint protein 1 (MDC1), previously known as Kiaa0170
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
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