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上海博尔森生物
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100 ml
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文献和实验入大量D-hanks调节渗透平衡,以***红细胞,但对白细胞没有影响;用D-hanks液洗涤细胞2~3次,用含有1mM/L的谷氨酸胺、100IU/ml青霉素G、100μg/ml链霉素、10%的胎牛血清的RPMI-1640重悬细胞,调节细胞浓度为5×106/ml,台盼兰染色检测细胞存活率大于95%;(7)接种至培养板或培养瓶中。
FSB,1×105 u/L青霉素G和50 g/L链霉素的M199培养基制成细胞悬液,按差速贴壁分离法纯化心肌细胞。加入10 μmol/L BrdU到细胞悬液,以6×105密度种植于96或24孔细胞培养板上,置37℃培养箱培养. 培养的心肌细胞24 h后更换含有10 μmol/L BrdU新鲜M199培养基,培养72 h后进行实验使用.设立阴性、阳性对照及实验组,每组20孔;阳性对照加入4 μmol/L STS,实验组中加入4 μmol/L STS后再分别加入250 μmol/L DIDS或100 μ
一、样本准备 收集细胞,200 目筛网过滤,收集滤液,300g 离心 5 min,弃上清。 向细胞中加入适量细胞染色 buffer(或含1%BSA的PBS),用移液枪轻轻吹打细胞重悬。 二、细胞计数 用血球计数板或其他仪器对悬液进行计数后,调整细胞浓度约为 1 × 107/mL。 三、设置实验分组 根据实验设计,设置实验分组,每管加入 100μL 细胞悬液。 四、封闭 Fc 受体 封闭 Fc 受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中,纯化的 CD16/CD32 单抗
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