食品中亚硝酸盐含量测试盒

食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒

微量法 100T/96S

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定，在食品加工业中作为保色剂，以维   持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体   长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。

测定原理：

在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基ben磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙2胺形成紫红色偶氮化合物，在 540nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、研钵或匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液一：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。提取液二：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。提取液三：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。粉剂四：粉剂 100 mg ×1 支，室温保存。试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂二：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。样品处理：
称取样品约 0.2g 鲜重或 0.05g 干重，破碎，加入 0.5 mL 提取液一，沸水浴 15min，冷却至
室温，加入 0.5 mL 提取液二，震荡摇匀，加 0.5 mL 提取液三，用镊子加少量粉剂四（约 1 mg），静置 30min，25℃，8000g 离心 15 min，取上清液待测。

测定步骤和操作表：

1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2、 操作表

	测定管	空白管
蒸馏水（µL）		70
样品（µL）	70
试剂一（µL）	65	65
试剂二（µL）	65	65
混匀，25℃静置 15min，于微量石英比色皿/96 孔板中检测 540nm 处吸光值 A。 △A=A 测定 - A 空白

注意：空白管只需测定一次。

相关图片：

亚硝酸盐含量计算：

1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为：y=0.234x + 0.0002，R2= 0. 999   x 为标准品亚硝suan钠浓度（μg/ml） y
为吸光值 A。
NO2-（μg/g）=（△A-0.0002）÷0.234×V 样÷（V 样÷V 样总×W）×0.6668
=（A – 0.086）÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×（△A-0.0002）÷W
V 样总：加入提取液体积，1.5 mL； V 样：反应中样品体积，0.07mL；W：样品质量，g。

2. 用 96 孔板测定的计算公式如下

注意事项：

1. 试剂盒 2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。
3. 若检测出得 OD 值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释（A540 <0.09 浓缩，A540 > 1.5 适当稀释）。
4. 最低检出限为 0.5μg/g。