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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Total antioxidant capacity (FRAP method) test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100管/96样

总抗氧化能力(FRAP 法)试剂盒说明书
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。研究意义:
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
测定原理:
在酸性环境下,抗氧化物质还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。自备实验用品:
恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。试剂组成和配制:
提取液:液体 120mL×1 瓶,使用前预冷。试剂一:液体 20 mL×1 瓶,避光保存。试剂二:液体 2 mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂三:液体 2 mL×1 瓶,避光保存。混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合,使用前 37℃预温。
样品的制备:
- 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过
30 d)后再测定。
- 组织样品
提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
- 细胞样品
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操作步骤:
1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 593nm。2、操作表
| 空白管 | 测定管 | |
| 样品(μL) | 10 | |
| 提取液(μL) | 10 | |
| 混合液(μL) | 190 | 190 |
| 充分混匀,反应 20min,于 96 孔板,测定 593nm 吸光值,△A= A 测定-A 空白 | ||
注意:空白管只需测定一次,若测定管吸光值大于 1.5 则需要用提取液稀释。
总抗氧化能力计算公式:
标准曲线:y = 1.2416x + 0.0134 R2 = 0.9996 x:Trolox 浓度(μmol/mL)y:吸光值差值△A
单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量来表示样本的总抗氧化能力。
- 按样本质量计算
=0.8054×(△A-0.0134)÷W
- 按样本蛋白浓度计算
=0.8054×(△A-0.0134)÷Cpr
- 按细胞计算
= 0.8054×(△A-0.0134)÷ 细胞数量(万个)
- 按液体体积计算
=0.8054×(△A-0.0134)
V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,10μL;W:样品质量,g;
Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL
注意事项:
- 试剂二对人体有刺激性,请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴乳胶手套操作。
- 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
- 样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
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文献和实验小鼠总抗氧化能力的测定 刘小美 宋菊敏 (2006-10-24) 一、原理 机体中有许多抗氧化物质,能使Fe3 + 还原成Fe2 + ,后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物,通过比色可测出其抗氧化能力的高低。 二、目的 1.掌握总抗氧化能力
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