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总抗氧化能力(FRAP法)测试盒

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  • XK-SJH-A250
  • 国产
  • 2025年07月14日
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      100

    • 英文名

      Total antioxidant capacity (FRAP method) test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/96样

    产品细节图片1
    总抗氧化能力(FRAP 法)试剂盒说明书

    微量法100T/96S

    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    研究意义:
    测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液,细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。

    测定原理:

    在酸性环境下,抗氧化物质还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。

    自备实验用品:

    恒温水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。

    试剂组成和配制:

    提取液:液体 120mL×1 瓶,使用前预冷。试剂一:液体 20 mL×1  瓶,避光保存。试剂二:液体 2 mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂三:液体 2 mL×1 瓶,避光保存。
    混合液(现配现用):将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合,使用前 37℃预温。

    样品的制备:

    1. 血清、血浆、唾液或尿液等液体样品
    血浆(制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝,不宜使用 EDTA  抗凝)4℃,5000rpm  离心
    10min,取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定,也可以-80℃冻存(不宜超过
    30 d)后再测定。
    1. 组织样品
    按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
    提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
    1. 细胞样品
    按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

    相关图片:
    产品细节图片2产品细节图片3

    操作步骤:

    1、 酶标仪预热 30min,调节波长至 593nm。
    2、操作表
      空白管 测定管
    样品(μL)   10
    提取液(μL) 10  
    混合液(μL) 190 190
    充分混匀,反应 20min,于 96 孔板,测定 593nm 吸光值,△A= A 测定-A 空白

    注意:空白管只需测定一次,若测定管吸光值大于 1.5 则需要用提取液稀释。
     
     

    总抗氧化能力计算公式:

    标准曲线:y = 1.2416x + 0.0134     R2 = 0.9996          x:Trolox 浓度(μmol/mL)
    y:吸光值差值△A
    单位定义:用从标准曲线上获得的抗氧化剂 Trolox 的量来表示样本的总抗氧化能力。
    1. 按样本质量计算
    总抗氧化能力(μmol Trolox/g 鲜重)=(△A-0.0134)÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×W)
    =0.8054×(△A-0.0134)÷W
    1. 按样本蛋白浓度计算
    总抗氧化能力(μmol Trolox/mg prot)=(△A-0.0134)÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×Cpr)
    =0.8054×(△A-0.0134)÷Cpr
    1. 按细胞计算
    总抗氧化能力(μmol Trolox/104cell)=(△A-0.0134)÷1.2416×V 样÷(V 样÷V 样总×细胞数量(万个))
    = 0.8054×(△A-0.0134)÷ 细胞数量(万个)
    1. 按液体体积计算
    总抗氧化能力(μmol Trolox/mL)=(△A-0.0134)÷1.2416
    =0.8054×(△A-0.0134)
    V 样总:加入提取液体积,1 mL;V 样:反应中样品体积,10μL;W:样品质量,g;
    Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL

     

    注意事项:

    1. 试剂二对人体有刺激性,请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴乳胶手套操作。
    2. 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂,否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
    3. 样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
    产品细节图片4

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