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超氧阴离子清除能力检测试剂盒

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  • XK-SJH-A271
  • 国产
  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      Superoxide anion scavenging capacity test kit

    • CAS号

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      50管/48样

    产品细节图片1

    超氧阴离子清除能力试剂盒

    分光光度法 50 管/48 样

    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

    测定意义
    超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

    测定原理

    AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成 NO2-,NO2-与对氨基ben磺酸和 α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。

    自备实验用品及仪器

    天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

    试剂组成和配制

    提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。 试剂一:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
    试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 12mL 蒸馏水充分溶解。试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂五:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。样品处理
    1.   组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL
    提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。2.   细胞:按照细胞数量(104  个):提取液体积(mL)为 500~1000:1  的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,
    总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
    1. 培养液或其它液体:直接检测。
    2. 粉剂药物可配制成相同浓度,比如 1mg/mL。

    测定操作

      对照管 测定管
    试剂一(μL) 40 40
    试剂二(μL) 160 160
    H2O(μL) 100  
    充分混匀,25℃反应 1min
    样品(μL)   100
    试剂三(μL) 200 200
    充分混匀,37℃反应 30min
    试剂四(μL) 200 200
    试剂五(μL) 200 200
    充分混匀,37℃显色 20min,于 1mL 玻璃比色皿,在 530nm 处测定
    对照管和测定管的吸光值,分别记为A 对照管和A 测定管。

    产品细节图片2产品细节图片3
    注意:对照管只需测定一次。
     

    计算公式

    超氧阴离子清除率 I%= A对照管- A测定管´100%
    A对照管

    注意事项

    1. 试剂一 4℃可保存 2 个月,配制好的试剂二 4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。
    2. 样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过 24 小时。
    产品细节图片4

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