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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Superoxide anion scavenging capacity test kit
- CAS号:
无
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/48样

超氧阴离子清除能力试剂盒
分光光度法 50 管/48 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
测定原理
AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成 NO2-,NO2-与对氨基ben磺酸和 α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。试剂组成和配制
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。 试剂一:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 12mL 蒸馏水充分溶解。试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。试剂五:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。样品处理
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL
提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,
总时间 3min);然后 4℃,10000g 离心 10min,取上清置于冰上待测。
- 培养液或其它液体:直接检测。
- 粉剂药物可配制成相同浓度,比如 1mg/mL。
测定操作
| 对照管 | 测定管 | |
| 试剂一(μL) | 40 | 40 |
| 试剂二(μL) | 160 | 160 |
| H2O(μL) | 100 | |
| 充分混匀,25℃反应 1min | ||
| 样品(μL) | 100 | |
| 试剂三(μL) | 200 | 200 |
| 充分混匀,37℃反应 30min | ||
| 试剂四(μL) | 200 | 200 |
| 试剂五(μL) | 200 | 200 |
| 充分混匀,37℃显色 20min,于 1mL 玻璃比色皿,在 530nm 处测定 对照管和测定管的吸光值,分别记为A 对照管和A 测定管。 ![]() ![]() |
||
计算公式
A对照管
注意事项
- 试剂一 4℃可保存 2 个月,配制好的试剂二 4℃可保存一周,建议实验前配制,并尽快使用。
- 样品处理完后立即进行测定,或者低温保存不超过 24 小时。
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文献和实验zw051202109 最近因实验,需要检测组织中的过氧化硝酸盐(NO与超氧化物反应,对细胞产生损伤),请问哪位做过这方面实验的战友,怎么检测,是否有商业化的检测试剂盒,万分谢谢 zfyyzz00 目前已经明确的是过氧化硝酸盐为NO与超氧阴离子反应的产物,是一种强氧化剂,它可以是氨基酸发生硝基化,从而对细胞膜、线粒体等造成损伤。因此硝酸酪氨酸是目前过氧化硝酸盐的一个公认的标志物(maker)。建议使用免疫组化方法检测硝基酪氨
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